关于FS和SS的问题

kobe327292007

1.现在我知道了FS和SS分别是前向角散射和侧向角散射，给它们加不同的电压时，可以分出来形状大小不同类型的细胞，不知道这个我理解的对不对？

比如上面这个图，我看老师做的时候就是调完电压分出来右下角一团细胞。这个样品呢是将淋巴细胞和一种肿瘤细胞共培养一段时间，然后看淋巴细胞分型。老师说这团细胞就是淋巴细胞，比较小，而且还算集中。

2.FS和SS后面跟的lin是什么意思？别的一些后面跟的是log？是不同的计算方式？

再看这张图，老师说画圈的地方，是肿瘤细胞跳过来的，所以其实不应该有，但是实际做实验又不可避免，我要如何才能尽量减少这个污染的细胞呢？

niwanmao

第1个问题我看不懂什么意思，加上合适的电压就是会分群啊，至于分几群，要看你的细胞性质。

第2个问题：lin和log确实是荧光强度的不同展示方式，lin是线性，是荧光直接检测值，log是对这类值进行log运算后得出的。

最后要减少这类对角线上的死细胞污染，一方面可通过FSC-A/FSC-H散点图排除，另一方面需加用7-AAD或LIVE/DEAD KIT等来排除死细胞。

kobe327292007

niwanmao 发表于 2013-5-22 20:39

                               
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第1个问题我看不懂什么意思，加上合适的电压就是会分群啊，至于分几群，要看你的细胞性质。

第2个问题：li ...

谢谢。第1个的问题的意思就是我以前不知道通过加电压就能给不同形态和体积细胞分群，后来大概听了那么一句，又通过看一些别人的发言，才认为通过给FS和SS加电压的确能够将不同细胞分群。我想问问以上这句话我理解是否有误，呵呵。

这个7-AAD或DEAD/LIVE KIT你们通常买哪家的？具体货号？如果不方便公开，PM也好。

niwanmao

kobe327292007 发表于 2013-5-22 21:10

                               
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谢谢。第1个的问题的意思就是我以前不知道通过加电压就能给不同形态和体积细胞分群，后来大概听了那么一 ...

7-AAD各大生物公司都有，随便挑，差不多的。
live/dead kit是invitrogen的

kobe327292007

niwanmao 发表于 2013-5-22 21:30

                               
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7-AAD各大生物公司都有，随便挑，差不多的。
live/dead kit是invitrogen的

好的，明白了，呵呵。

didi_zhou

niwanmao 发表于 2013-5-22 20:29

                               
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第1个问题我看不懂什么意思，加上合适的电压就是会分群啊，至于分几群，要看你的细胞性质。

第2个问题：li ...

对角线上的细胞可以用没有信号的通道组合来排除，当然倪老师用LIVE/DEAD kit效果更好。但有时候不一定是子细胞会造成火箭风（非特异性染色），细胞状态差的时候，膜表面粘度增加也会，这个时候使用在不用的两个通道上组合也会看见这样的峰出来，可以圈出来，再设个逻辑门排除，也可以达到不错的效果。

阿达非

didi_zhou 发表于 2013-6-24 22:30

                               
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对角线上的细胞可以用没有信号的通道组合来排除，当然倪老师用LIVE/DEAD kit效果更好。但有时候不一定是 ...

子细胞是啥？

didi_zhou

阿达非 发表于 2013-6-24 23:11

                               
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子细胞是啥？

死细胞，写错。