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[其它临床检测] 多聚甲醛固定后不能裂解红细胞

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发表于 2011-1-14 16:48:25 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星已解决
最近准备开一个临床的项目:血小板-白细胞聚集体的检测,按照文献说抽血后要用1%终浓度的多聚甲醛固定,然后标记抗体,然后裂解红细胞,再用多聚甲醛固定,待上机。但我发现,用多聚甲醛固定后,红细胞不能裂解(用的是BD裂解液),没有固定的就裂解得很好,想请教老师怎么解决这个问题,万分感谢!

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多聚甲醛固定后的确很难裂解,可以尝试一下离心后,再用氯化铵裂解液试试。 另外,步骤我建议你参考current protocol in cytometry中的相关章节,这本书比较权威:http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread&tid=64&highlight=%E8%A1%80%E5%B0%8F%E6%9D%BF%2B%E7%99%BD%E7%BB%86%E8%83%9E
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发表于 2011-1-14 16:48:26 | 显示全部楼层
多聚甲醛固定后的确很难裂解,可以尝试一下离心后,再用氯化铵裂解液试试。
另外,步骤我建议你参考current protocol in cytometry中的相关章节,这本书比较权威:http://www.flowcyto.cn/bbs/forum ... D%E7%BB%86%E8%83%9E
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 楼主| 发表于 2011-1-17 16:08:33 | 显示全部楼层
非常感谢老师的指导,按照指导再摸索一下。
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 楼主| 发表于 2011-1-21 17:49:49 | 显示全部楼层
经老师指点,我固定后用PBS洗一遍,再裂解就非常完全了,谢谢老师指教。
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发表于 2011-1-27 20:45:19 | 显示全部楼层
这么好,留着以后看看,碰到这问题的话也这么解决
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发表于 2011-3-10 11:13:40 | 显示全部楼层
我们都直接标CD45,把CD45的阈值打高删掉红细胞,懒得裂解红细胞了!
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发表于 2011-3-10 11:20:04 | 显示全部楼层


一般情况下这是没有问题的,但如果白血病免疫分型时做到了M6,你就可能把原始或幼稚红细胞给忽略掉,而且也可以把一些浆细胞疾病给忽略掉了。所以也不建议这样做。
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发表于 2011-3-21 08:14:40 | 显示全部楼层
一般情况下这是没有问题的,但如果白血病免疫分型时做到了M6,你就可能把原始或幼稚红细胞给忽略掉,而且 ...
niwanmao 发表于 2011-3-10 11:20


恩,对,特殊血液疾病我们应该特殊对待


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