流式细胞术中的同型对照

niwanmao

标题：流式细胞术中的同型对照

同型对照（即Isotype Control），是与该抗体相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同亚型的免疫球蛋白，用于检测由于抗体非特异性结合而产生的背景染色。一般来说，每种单抗在说明书中都列出有其相应的同型对照；如果是多抗，可以用与该抗体来源相同的正常血清作为同型对照。

阴性对照（Negative control），是指使用除了处理因素（如药物）之外，其它实验条件相同的细胞，进行相同的抗体染色，以此作为实验的阴性对照。

在流式细胞术的检测中，同型对照比阴性对照更重要，抗体的表达率是依据同型对照设定的标尺进行界定的。

南瓜妹妹

倪老师，您好，我想问 一下同型对照抗体，只要是种属来源、亚型和荧光相同就可以了吗？同型抗体可以共用吗？比如我购买小鼠抗人PD-1抗体FITC荧光抗体，其同型抗体为 Isotype: FITC Mouse IgG2a, k，我购买的另外一种抗体小鼠抗人的CD56 FITC抗体，同型抗体为 Isotype: FITC Mouse IgG2a, k；我想问一下，如果我测CD56，可以用PD-1的同型抗体吗？还是只能每一种蛋白分子对应一种同型抗体呢？

Deanou

老师，想问一下如果用四种抗体标记染色，选的同型对照是用什么呢？

niwanmao

Deanou 发表于 2019-12-17 11:08
老师，想问一下如果用四种抗体标记染色，选的同型对照是用什么呢？

已在http://flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread&tid=8126 回答，同型对照概念基本上成过去时了。

刘小黑

同型对照和指标同种属、同亚型，同荧光，型但是不同生产厂家，有参照意义吗？

niwanmao

刘小黑 发表于 2020-7-10 13:21
同型对照和指标同种属、同亚型，同荧光，型但是不同生产厂家，有参照意义吗？ ...

可以，但是同型对照一般多数情况下都不需要用，用Fc 阻断+正确的染色步骤+合适的生物学阴性对照都能解决。