jc-1检测肺泡二型上皮细胞线粒体膜电位

rolling

各位前辈，本人第一次用流式检测线粒体膜电位，购买的jc-1是碧云天的，按照说明书操作后上机检测，所用机器是beckman fc500.
对于结果有几个不明白的地方，希望各位前辈提点。
1，control 染色组与 cccp处理组变化不大，
2，加药组与cccp处理组变化也不大。
3，无论如何调节补偿，得到的点图都是斜的。

niwanmao

大致看了下比例，确定都差不多。
不知道是不是你在消化的时候导致的细胞损伤？

另外，补偿调成这样也足够了，只要把下面那群圈出来就行了，不是说非得用十字门。

rolling

niwanmao 发表于 2015-12-9 15:11
大致看了下比例，确定都差不多。
不知道是不是你在消化的时候导致的细胞损伤？

谢谢倪老师。我也考虑消化过度的问题，原代细胞贴壁比较牢，已经尽量缩短胰酶消化时间了，不知道倪老师有没有更好的办法解决细胞消化损伤的问题。

niwanmao

rolling 发表于 2015-12-9 16:46
谢谢倪老师。我也考虑消化过度的问题，原代细胞贴壁比较牢，已经尽量缩短胰酶消化时间了，不知道倪老师有 ...

你是先消化成悬浮细胞然后再染色？可以考虑直接把染液加进去，染色完毕去掉染色液再刮下来或消化下来

rolling

niwanmao 发表于 2015-12-9 18:04
你是先消化成悬浮细胞然后再染色？可以考虑直接把染液加进去，染色完毕去掉染色液再刮下来或消化下来 ...

我是先消化再染色的，下次试试版上染色再消化，还有个问题想问问倪老师，jc-1的浓度需要滴定吗。浓度会不会影响荧光强度。

niwanmao

rolling 发表于 2015-12-9 20:49
我是先消化再染色的，下次试试版上染色再消化，还有个问题想问问倪老师，jc-1的浓度需要滴定吗。浓度会不 ...

多数情况下还好，滴定一下比较好。