Fc封闭处理和CD16染色

Shura · 发表于 2018-2-2 16:45:20

想请问下各位老师，现在流式样本处理一般建议进行Fc受体封闭，但CD16又是FcγⅢ受体，如果进行相关实验样本是否还能进行该处理？CD16会不会本身非特异也比较高呢？另外听别人说小鼠和人Fc封闭有差异，请问是什么意思呢？

niwanmao · 发表于 2018-2-2 19:39:10

染CD16，就不用进行Fc受体封闭，因为这个抗体分群很好。
小鼠的Fc受体封闭，大多数用大鼠的2.4G2克隆号的IgG单抗（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/90108）

chevalierx · 发表于 2018-2-3 01:26:27

小鼠封闭采用中和抗体，人常见采用阻断剂，采用的试剂不同。我进行过同批样品是否封闭对流式结果有影响，发现影响还是存在的，尤其在你不确定你所进行的处理或者基因型是否影响了CD16/32表达的时候，建议封闭CD16/32，我一般0.25μL/100μL sample，4℃封闭15min。

Shura · 发表于 2018-3-26 10:38:45

chevalierx 发表于 2018-2-3 01:26
小鼠封闭采用中和抗体，人常见采用阻断剂，采用的试剂不同。我进行过同批样品是否封闭对流式结果有影响，发 ...

十分感谢

Shura · 发表于 2018-3-26 10:39:15

niwanmao 发表于 2018-2-2 19:39
染CD16，就不用进行Fc受体封闭，因为这个抗体分群很好。
小鼠的Fc受体封闭，大多数用大鼠的2.4G2克隆号的Ig ...

十分感谢倪老师的回答

moreorless · 发表于 2019-8-13 17:24:02

请问，封闭完了是否需要洗，还是直接加抗体？

niwanmao · 发表于 2019-8-13 22:23:36

moreorless 发表于 2019-8-13 17:24
请问，封闭完了是否需要洗，还是直接加抗体？

一般不需要。

moreorless · 发表于 2019-12-26 23:26:20

niwanmao 发表于 2019-8-13 22:23
一般不需要。

谢谢倪老师！

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