请教淋巴细胞分离液分离单个核细胞后FSC/SSC圈淋巴群

yrryrr

图一为淋巴细胞分离液分离人的单个核细胞，在 BD jazz仪器上的FSC/SSC上的分群，按照位置大概位置圈了淋巴细胞和单核细胞，请教一下是否准确，在接近碎片的位置还有一群聚集的紫色圈内的，到底应该是算做碎片还是？

                               
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图二为大鼠细胞分离液分离大鼠的单个核细胞，在相同的机子上的分群，请问该如何圈中淋巴群，SSC和FSC都比较小的那群是什么细胞？

                               
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谢谢倪老师和各位站友！@niwanmao

sunny2829

如上图，淋巴细胞分离液分离PBMC，还是比较成熟的技术，一般不会有什么问题。

yrryrr

sunny2829 发表于 2018-12-5 10:12
如上图，淋巴细胞分离液分离PBMC，还是比较成熟的技术，一般不会有什么问题。
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老师您好，因为刚开始做流式，绿色圈中SSC比较大的那群为啥是死细胞呀，细胞死亡后粒度会变大么？PBMC后面那群是单核细胞么？另外死细胞这么多应该如何进行改进？谢谢老师，非常感谢

sunny2829

细胞死亡的话，颗粒度是会增加的，另外FSC也很小，细胞已经固缩了，或者已经是凋亡小体了。PBMC后面那群如果分群明显的话，应该就是单核细胞了。
死细胞那么多，改进的话需要根据你具体的操作呀。比如取新鲜样本当天操作，操作速度快点，操作温和点等等。