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标题：关于补偿调节的若干问题讨论 流式细胞术检测中，经常需要对各个荧光通道进行补偿调节，如何进行补偿调节往往成为难题。
根据个人体会，我认为调节补偿时，需要将不同通道检测的抗体与同型对照搭配，例如我们要调节FL1和FL2之间的补偿，检测用到了抗体A FITC和抗体B PE，那么就还需要同型A FITC和同型B PE。调节补偿时的搭配是：
管1： 抗体A FITC、 同型B PE
管2： 抗体B PE、同型A FITC
管3： 同型A FITC、 同型B PE
首先上管3，进行电压的初步调节，使细胞群的荧光强度基本上落在101之内。
其次上管1，调节FL2-FL1的补偿。
然后上管2，调节FL1-FL2的补偿。
最后再次上管3，验证调节结果和细胞群的位置仍然能够大致落在101之内。
在补偿调节过程中，可以对电压进行微调，但是最后一步的验证是必要的，是为了防止电压调节过度出现假阳性或假阴性。
①下面先提一个问题，下面5个图中，哪个才是正确的补偿调节？
应该是图3才是正确的，1、2、5都很明显是错误的，但有些朋友可能认为4为什么不正确，其实我们调节补偿并不是以十字门的MARKER作为标准的，而是应该以阳性细胞群和阴性细胞群的中心位置为准，只有图3的阳性细胞群和阴性细胞群的中心位置在一个水平线上。
②再提一个问题，下面哪个图的补偿调节是正确的？
正确答案应该是这5个图都是错误的补偿调节。虽然3看来上跟上面那个问题的标准差不多，但因为阴性细胞群有一半在坐标下方，就是说PE的电压调的太低了。这也是错误的补偿调节的一种表现。
上面的两幅图来自http://drmr.com，欢迎大家在此热烈讨论。 回答者：dugo 受益匪浅 谢谢 2009年8月12日 0:54 回答者：dugo 难道正确的流式双标都应该阳性和阴性分的如此清楚吗，我的就是一片混杂。 2009年8月12日 0:54 回答者：niwanmao 的确，上面两幅图是理想状态。在实际情况上，还是存在一部分情况下分的并不清楚。这时的补偿可以这么来做。
比如你做DC的试验，这时CD86表达并不高，你可以用正常人的单核细胞来调补偿和电压，调好之后检测DC，DC的阴性、阳性MARKER可用它本身的同型对照来设。这就没有问题。对同一个抗体来说，这种补偿还是可以通用的。 2009年8月12日 0:54 | 
发表于 2010-8-1 19:00:17
发表于 2011-12-25 20:35:43
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