肿瘤组织TIL中CD4不分群

言西早 · 发表于 2019-7-10 16:42:55

最近做了几次肿瘤组织的流式，分了淋巴细胞后再去上机的，发现单阳管CD4细胞不分群，但CD3和CD8都有一定程度的分群。我排除了抗体、操作等问题，就是不知道问题出在哪。
下图分别是CD3、CD4、CD8的单染管：

niwanmao · 发表于 2019-7-11 08:44:16

FSC/SSC、CD3/CD8的图看一下。

Jeff · 发表于 2019-7-11 20:27:50

肿瘤细胞分析的时候，最好还是把FSC-SSC的图放上来才好~~~毕竟圈门的正确与否很关键

tiger · 发表于 2019-7-12 08:44:33

不要分离淋巴细胞，用CD45圈门。分离太繁琐，且回收率很低、丢失细胞成份。

烟雨任平生 · 发表于 2019-7-23 22:32:49

消化肿瘤组织用的是什么酶？消化时长是多少？不同的抗原表位对不同的酶有不同的敏感性。

tiger · 发表于 2019-7-24 08:34:29

烟雨任平生发表于 2019-7-23 22:32
消化肿瘤组织用的是什么酶？消化时长是多少？不同的抗原表位对不同的酶有不同的敏感性。 ...

不用酶，机械分离

黄LL00 · 发表于 2020-7-23 20:06:33

tiger 发表于 2019-7-12 08:44
不要分离淋巴细胞，用CD45圈门。分离太繁琐，且回收率很低、丢失细胞成份。 ...

想请问如何用CD45圈门，哪一群细胞才是CD45+的细胞，我在做肿瘤组织TIL的时候也碰到了CD4、CD8分群不明显的问题。

niwanmao · 发表于 2020-7-24 07:35:47

黄LL00 发表于 2020-7-23 20:06
想请问如何用CD45圈门，哪一群细胞才是CD45+的细胞，我在做肿瘤组织TIL的时候也碰到了CD4、CD8分群不明显 ...

圈CD45高表达、SSC和FSC小的。

黄LL00 · 发表于 2020-7-24 15:16:50

niwanmao 发表于 2020-7-24 07:35
圈CD45高表达、SSC和FSC小的。

谢谢老师！

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