Treg多色调补偿

忞勣的FACS

我使用Rat Spleen研磨后的细胞样品调补偿，
单染管分别是
FVS：Amcyan、
CD45：APC-cy7
CD3：FITC
CD4：PE-Cy7
CD25：APC
Foxp3：PE
下图是用Flowjo调手动调补偿的图，截图是Foxp3和CD3补偿调节，阴阳性群分群也可以，但奇怪的是，这个“？？？”为何是斜着的？好像也去不掉，是单染管做的不好吗？

Climber

如果补偿没问题的话应该是死细胞来的非特异性荧光或自发荧光，其波长通常在450-600波长的通道内能够被检测到。
但是您的图不太合理吧，FOXP3+CD3-理论上不存在或者很少有这群细胞吧，斜着的那群应该是CD3单阳的，Foxp3单阳的应该是CD3 FOXP3双阳的，那就是FITC对PE的补偿还不够

忞勣的FACS

Climber 发表于 2022-8-27 10:45
如果补偿没问题的话应该是死细胞来的非特异性荧光或自发荧光，其波长通常在450-600波长的通道内能够被检测 ...

去除了黏连和死细胞后，“？？？”斜着的细胞群消失了，应该就是死细胞导致的异常，谢谢了 ！