人外周血测TH17遇到的问题

wangmei19850809

各位老师好，我在测人外周血TH17细胞时，将孵育好的细胞分四管，分别标记为BLACK，FITC，PE，FITC+PE，各加入100微升孵育好的细胞，以BLACK作为同型对照，不加各荧光抗体相同IgG 的同型抗体作为同型对照可以吗，我看文献也有人这样做，所以我也分了四管，但做流式的老师说是这样不行，请老师指教谢谢。

niwanmao

wangmei19850809 发表于 2011-9-16 07:34

                               
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各位老师好，我在测人外周血TH17细胞时，将孵育好的细胞分四管，分别标记为BLACK，FITC，PE，FITC+PE，各加 ...

只能说是不符合标准规程，因为用同型对照是为了排除背景。blank却属于什么都不加的，就是说没有起到排除背景的作用，往往比同型对照的荧光也低很多。

wangmei19850809

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那我这样做是不没有意义啊？结果是不也不认可啊？

niwanmao

wangmei19850809 发表于 2011-9-16 08:53

                               
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那我这样做是不没有意义啊？结果是不也不认可啊？

对。
所以建议你最好还是订个跟IL17抗体亚型相同的同型对照。