从图片看。这细胞是阻滞吗？

赖浩强

samly0 发表于 2013-6-19 16:23

                               
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1、从control组看，一般我们看到这种颗粒的黑点，加上细胞中有些形态有细长拖尾，尾部也有颗粒的，都会高度 ...

加药处理的细胞，每次做流式的时候都有这些小黑点，在培养瓶里面或者用皿养细胞的时候都看看不见这些小黑点的，但是加药处理后就会很多了~加药组有初步可以认为是药物，但是对照组都那么多~真是无法解释，问过很多人，他们给予的解释是“这些小黑点是黑胶虫，是培养环境不好造成的”，老师们说的支原体污染我也不清楚，也不知道支原体污染后的细胞是怎样的。。。。。希望能得到解释，谢谢。

niwanmao

赖浩强 发表于 2013-6-26 17:19

                               
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加药处理的细胞，每次做流式的时候都有这些小黑点，在培养瓶里面或者用皿养细胞的时候都看看不见这些小黑 ...

我做研究生的时候，黑胶虫之说也很盛行，但是说实话，这黑胶虫究竟是什么虫，谁都说不清，所以我觉得更多可能是一种错误的说法。
至于背景上是支原体还是普通的脏东西，可以参考http://www.shigen.nig.ac.jp/shigen/news/n_letter/2008/newsletter_v4_n6En.html最底下所说的（如下图），用DNA染色，在荧光显微镜下看看：

支原体污染的DNA染色鉴别方法

samly0

支原体虽然光镜下看不见，但是感染的支原体的细胞形态和背景改变还是有迹可循的，比如说背景多了些小黑颗粒，细胞平铺状态改变，细胞表面毛糙，生长状态不好等，但是要确诊还是用专业的试剂盒（听说很贵，没用过）或者像倪老师说的DNA染色后再看，我们一般发现污染支原体都会弃掉细胞不用了，重新再订购，如果细胞来源很珍贵很稀少，建议买商品化的试剂盒，听试剂销售说大概六千多，好贵，我们都用不起，所以都没买个

samly0

niwanmao 发表于 2013-6-26 19:43

                               
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我做研究生的时候，黑胶虫之说也很盛行，但是说实话，这黑胶虫究竟是什么虫，谁都说不清，所以我觉得更多 ...

听我同事说这个染DNA要显微镜有紫外模块的才能用

didi_zhou

samly0 发表于  2 小时前

                               
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支原体虽然光镜下看不见，但是感染的支原体的细胞形态和背景改变还是有迹可循的，比如说背景多了些小黑颗粒，细胞平铺状态改变，细胞表面毛糙，生长状态不好等，但是要确诊还是用专业的试剂盒（听说很贵，没用过）或...

有个试剂，貌似是个叫invivogen的公司做的，貌似以前从Invitrogen出来的。

didi_zhou

samly0 发表于  2 小时前

                               
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niwanmao 发表于 2013-6-26 19:43      
我做研究生的时候，黑胶虫之说也很盛行，但是说实话，这黑胶虫究竟是什么虫，谁都说不清，所以我觉得更多 ...  
听我同事说这个染...

一般汞灯的荧光显微镜可以滤出UV来，实在不行用紫光也能勉强看看。

赖浩强

samly0 发表于 2013-6-27 12:05

                               
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支原体虽然光镜下看不见，但是感染的支原体的细胞形态和背景改变还是有迹可循的，比如说背景多了些小黑颗粒 ...

好的，谢谢老师们的建议！