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楼主: wsnxbdr

[结构和原理] 电信号与电压是否成正比,电压和增益的区别

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发表于 2014-9-30 09:00:46 | 显示全部楼层
关于增益,新的数字式的流式已经不保留了
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发表于 2014-9-30 14:02:28 | 显示全部楼层
本帖最后由 yzz123322 于 2014-9-30 14:03 编辑
haven_t 发表于 2014-9-30 08:26
检测的重点其实是阳性群体,所以首先保证阳性群体的显示。同时双指数只能优化低值数据,不影响高值数据。 ...

比方说 我某次做的数据, CD3和CD8, CD8明显比CD3分布宽很多, 没开双指数会有很多压线, 首先在3 4 8 25 里 , 调补偿是看 3 和8的中位数? 不用管它的宽度? 还有就是画十字象限时, 按照3的 来画 还是8的画? 还有 有没有方法 让8的变窄一些 ?  如果此时 我增加3 或者8的电压能让它们2组分布差不多嘛?   可能问的比较简单,先谢谢了  @haven_t  
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发表于 2014-9-30 18:32:22 | 显示全部楼层
yzz123322 发表于 2014-9-30 14:02
比方说 我某次做的数据, CD3和CD8, CD8明显比CD3分布宽很多, 没开双指数会有很多压线, 首先在3 4 8 25 ...

补偿按照median来调节。至于最后设门,可按照如下设门(不规则十字门,现在很多软件都有): 2014-09-30_183124.gif

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  发表于 2014-10-4 07:54
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发表于 2014-10-1 08:11:49 | 显示全部楼层
yzz123322 发表于 2014-9-30 14:02
比方说 我某次做的数据, CD3和CD8, CD8明显比CD3分布宽很多, 没开双指数会有很多压线, 首先在3 4 8 25 ...

这很正常,因为CD8荧光强度的测量误差会随着补偿运算进入CD3通道中,所以CD8+的群体CD3的离散程度比CD8-的大。在对数显示的时候不那么明显,但是在双指数下会强化了这个现象,因为CD3通道中该群体落在阴性区域,双指数在这里是近线形的。所以建议改变分析的策略,倪老师提出的办法很好,或者用其他类型的门也可以。要做25,阴性对照管里面的348也要加进去,以消除这些对25的离散造成影响。
这时候调节电压的方法不可取,因为电压改变会导致补偿改变。

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  发表于 2014-10-4 07:54
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发表于 2014-10-8 10:48:20 | 显示全部楼层
不错,这些解释的很全面,学习了,谢谢!
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发表于 2017-11-30 09:07:43 | 显示全部楼层
haven_t 发表于 2013-6-20 20:55
PMT后有一级放大器,所谓增益其实就是一个与对数放大器平行的线性放大器。数字型就是取消了这一级别的放 ...

老师您好~我想请教 我们平台提供的是贝克曼的cytoflex仪器,好像是只能在上样的时候调增益,软件处理时不能调整。结果我在旧仪器刚开始用的时候没有注意,细胞群分得不开(估计因为增益太小),但在新仪器用的时候细胞群又分开了(增益是前者的10几倍)。请问这种情况应该怎么处理旧的数据呢?还有我们进行实验时应该遵循怎样的调节准则呢?仅仅是肉眼能看到分群作为标准妈?
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发表于 2017-11-30 14:10:10 | 显示全部楼层
minazeng 发表于 2017-11-30 09:07
老师您好~我想请教 我们平台提供的是贝克曼的cytoflex仪器,好像是只能在上样的时候调增益,软件处理时不 ...

旧数据如果可以修改电压的话,那不得了了,数据都可以造假了。
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发表于 2017-12-5 00:59:32 | 显示全部楼层
minazeng 发表于 2017-11-30 09:07
老师您好~我想请教 我们平台提供的是贝克曼的cytoflex仪器,好像是只能在上样的时候调增益,软件处理时不 ...

1. 流式检测三大条件(电压/增益、补偿、阈值)中,只有电压/增益是只能在线调节的,是不可逆影响结果的。遇到这种事,我只能说下次注意了。
2. CytoFlex的确有点麻烦,因为它既有增益又有缩放,而这俩条件都会影响流式图形态。新手常常一会拉拉增益,一会拉拉缩放,然后增益就乱了。解决问题很简单,在建立方案的时候不要动缩放,把显示范围固定在10^2-10^7,只调增益就行了。
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