流式和固定，不得不说的秘密

EthanMr · 发表于 2015-1-16 14:14:46

niwanmao 发表于 2015-1-16 13:29
甲醛溶液中加入了甲醇防止多聚化，所以可以这么说。

明白了，多谢倪老师！

liliqianyi · 发表于 2015-1-30 17:47:44

“甲醛固定2~3小时后必需离心去除，否则固定时间过长会导致自发荧光显著增高。离心之后，细胞就可以保存在PBS中了。”

倪老师，对于这句话不太懂。我们这边临床，经常加的1%的多聚甲醛固定液过夜，加量很少，约100ul，第二天直接上机。这怎么理解。
多谢倪老师指教。

niwanmao · 发表于 2015-1-31 11:53:34

liliqianyi 发表于 2015-1-30 17:47
“甲醛固定2~3小时后必需离心去除，否则固定时间过长会导致自发荧光显著增高。离心之后，细胞就可以保存在P ...

意思就是固定时间不能过长，否则自发荧光太强会影响检测结果。

爱白衣杀手 · 发表于 2015-3-19 14:23:12

“甲醛固定2~3小时后必需离心去除，否则固定时间过长会导致自发荧光显著增高。离心之后，细胞就可以保存在PBS中了。”意思是说固定后的细胞可以在PBS中长期保存吗？不用一直放在固定剂里边吗？

niwanmao · 发表于 2015-3-19 21:45:43

爱白衣杀手发表于 2015-3-19 14:23
“甲醛固定2~3小时后必需离心去除，否则固定时间过长会导致自发荧光显著增高。离心之后，细胞就可以保存在P ...

是的，但是不能期望几个月

vivic5015 · 发表于 2018-4-18 21:43:43

倪老师，是否可以用4%甲醛溶液固定细胞？4％甲醛溶液固定细胞和4%多聚甲醛溶液固定细胞有什么区别？

niwanmao · 发表于 2018-4-19 19:14:15

vivic5015 发表于 2018-4-18 21:43
倪老师，是否可以用4%甲醛溶液固定细胞？4％甲醛溶液固定细胞和4%多聚甲醛溶液固定细胞有什么区别？ ...

理论上最终起效果的成份就是甲醛，或许可通用，但最好是对比一下。

cocoa · 发表于 2019-9-6 20:36:24

“醇类会破坏蛋白质的构象，所以如果你的抗体与目标蛋白的结合依赖于其特定构象或表位”老师，要测的胞内蛋白大多都是依赖于特定构象或表位的，意思是染胞内蛋白上流式就不能用乙醇固定了吗

niwanmao · 发表于 2019-9-8 10:40:00

cocoa 发表于 2019-9-6 20:36
“醇类会破坏蛋白质的构象，所以如果你的抗体与目标蛋白的结合依赖于其特定构象或表位”老师，要测的胞内蛋 ...

不是这个意思，需要用实际检测来验证。

cocoa · 发表于 2019-9-8 16:29:52

niwanmao 发表于 2019-9-8 10:40
不是这个意思，需要用实际检测来验证。

好的，我今天用乙醇固定了，看下明天结果咋样

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