分选Th17细胞

lichunling · 发表于 2017-10-9 20:41:07

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从人外周血中分离的PBMCs，流式分选出Th17细胞，下一步要做单细胞测序，可是分选Th17时需要破膜，细胞已经无法体外培养了，想请教群里的老师还能继续做单细胞测序吗？有人做过类似的实验吗

niwanmao · 发表于 2017-10-10 09:06:14

你又发错版块了，只能扣你一颗流星了。

下面回答问题，如果要分选Th17，可以考虑表面标记，里面用CD183和CD196，不一定必须用胞内标记。

lichunling · 发表于 2017-10-26 11:26:57

niwanmao 发表于 2017-10-10 09:06
你又发错版块了，只能扣你一颗流星了。

下面回答问题，如果要分选Th17，可以考虑表面标记，里面用CD186和C ...

好的谢谢老师如果这么标记分选的话能分选出多少呢

niwanmao · 发表于 2017-10-26 16:22:38

lichunling 发表于 2017-10-26 11:26
好的谢谢老师如果这么标记分选的话能分选出多少呢

分选出多少是什么意思？

lichunling · 发表于 2017-10-30 14:52:00

老师是CD183和CD196吗

niwanmao · 发表于 2017-10-30 17:36:37

lichunling 发表于 2017-10-30 14:52
老师是CD183和CD196吗

哦是的。前面笔误。

lichunling · 发表于 2017-10-30 23:26:15

niwanmao 发表于 2017-10-30 17:36
哦是的。前面笔误。

好的谢谢老师

liuruiluna · 发表于 2017-11-3 16:49:41

分选出多少取决于你的起始样本细胞数和所含的细胞比例，一般如果样本不是非常难以得到的话，最好先做一个预实验，用一点点细胞做一下流式分析，都弄清楚了，调整好了，再做分选实验。这样不会造成样本和大量抗体浪费的损失。还有就是：不是样本中所有的目标细胞都会被分选出来，无论是哪一种分选方法都会有一定的细胞丢失，根据细胞含量和操作手法，仪器的分选纯度模式设置，会有不同。主要还是做预实验来做到心中有数。

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[流式分选] 分选Th17细胞

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