肺全组织，细胞单染APC（标记LY-6c）后，散点图细胞不是水平

破雨蝉

流式新手遇到一些问题，想请大家帮我看看，谢谢了
标本的处理：肺组织匀浆后，裂红，染色


1 单染和双染APC管右边部分上翘，该怎么解决呢？
参数是默认的
2      空白未染色部分也有部分上飘的细胞，该怎么调整呢

niwanmao

1、单染F4/80的APC那部分阳性是非特异性信号，你可以试一下先染色后裂红试试。如果仍不行，再加一步2%多聚甲醛固定、洗涤。
2、空白管那些也是非特异性信号。不用管。

破雨蝉

niwanmao 发表于 2018-4-12 19:33
1、单染F4/80的APC那部分阳性是非特异性信号，你可以试一下先染色后裂红试试。如果仍不行，再加一步2%多聚 ...

老师您说的是APC单染的那组，右边上翘的是非特异性信号是么？

破雨蝉

niwanmao 发表于 2018-4-12 19:33
1、单染F4/80的APC那部分阳性是非特异性信号，你可以试一下先染色后裂红试试。如果仍不行，再加一步2%多聚 ...

还有就是如果按这样分析，怎样画门界定阴阳性呢，可以就是十字还是说需要单独的圈门把在这部分上翘的排除掉就可，麻烦了

niwanmao

破雨蝉 发表于 2018-4-12 19:52
老师您说的是APC单染的那组，右边上翘的是非特异性信号是么？

PC7单染，APC阳性部分全是非特异信号。
APC单染者，右侧阳性部分与PC7单染类似的图形也是非特异性信号。

破雨蝉

niwanmao 发表于 2018-4-12 20:51
PC7单染，APC阳性部分全是非特异信号。
APC单染者，右侧阳性部分与PC7单染类似的图形也是非特异性信号。 ...

感谢老师，下次按您的方法试试看，再次谢谢您的建议

ahychang

老師，請問這不是因為APC 和PC7 補償的因素嗎？我是新手，経驗不足。

niwanmao

ahychang 发表于 2018-5-1 11:47
老師，請問這不是因為APC 和PC7 補償的因素嗎？我是新手，経驗不足。

你是指楼主配图里面那些上翘很厉害的拖尾吗？那些更像非特异性染色，常见于组织样本的多色流式里面。可能与标本有关，也可能与仪器有关，解决办法，就是通过单染或FMO看看其背景信号。