为何293t一处理就死，流式检测死亡

潘潘杰

整个实验流程就是，把状态很好的293t 消化下来（0.125%胰酶），2min后中和，pbs重悬后加了PI（图1和2），另外一管加了另外一个死细胞染料zombile，pi不需要洗涤，那个僵尸染料会洗一下，最后都是用pbs+2%fbs+1mmol edta 重悬后上机，发现每次上机，都是全阳性的，也就是说细胞都死了，阴性调好电压后，单阳管都是阳性的，请问大家为何这么处理一下细胞就死了。。什么原因呢？

潘潘杰

图2是unstained 管，图1是单染了zombie的管，图3是单染pi管，图4也是一个阴性管

niwanmao

潘潘杰 发表于 2018-5-14 19:18
图2是unstained 管，图1是单染了zombie的管，图3是单染pi管，图4也是一个阴性管

293T应该是贴壁细胞吧，处理的时候应该容易受破坏。
另一个选择就采用live/dead或zombie之类的非核酸类死活染料来区分。