percp-cy5.5和apc染料为什么能够共染？从流式仪结构上解释不通

hezeljgouc

immunology 发表于 2018-5-25 20:17
您这句话我不太懂，“而apc染料同时被蓝光激发并被percp-cy5.5通道接收的信号才是你所说的“apc漏到percp ...

至于你们用的verse机器虽然只有一套PMT，但是其中的荧光通道也是和激光相对应的，不同激光器激发的信号也是在不同的时间检测并记录的。你说只有一个7角的，那应该是中间这个2激光6色的型号。BD把它做成一个集成的7角PMT只是为了减小机器的体积。

immunology

hezeljgouc 发表于 2018-5-26 20:12
至于你们用的verse机器虽然只有一套PMT，但是其中的荧光通道也是和激光相对应的，不同激光器激发的信号也 ...

您说的很好，我原先想的跟您一样，因为我是学生，不大方便拆开机器看里面的滤光片型号，但是我推理我们的流式是双激光用了5个荧光滤片，其中pe-cy7和apc-cy7用的一个。
我问了问一下bd流式工程师，他说里面有pinhole，用光纤引导到不同的接收盘上，然后具体怎么回事也跟我说的不是很清楚。我猜测是不是这个pinhole跟单光子共聚焦那个原理一样，起到了只收特定激光激发的荧光的作用？

家的感觉

hezeljgouc 发表于 2018-5-21 15:56
laser delay

你好！BD aria的分选，要进行accudrop进行液滴延迟设置，只是分选时要做的。但有一点不理解，平时如果用aria进行分析时不进行液滴延迟设置，如何确保delay的准确？主要是我对里面的光路原理啥的不大了解，谢谢！

家的感觉

hezeljgouc 发表于 2018-5-21 15:56
laser delay

不好意思，我说的应该是drop delay，您说的是laser delay，两个还不是一回事，我理解错了，laser delay应该是仪器默认设置好的对吗？相当于多个激光束并不是聚焦到一个点？也就是BD的流式基本都是类似的结构是不？

hezeljgouc

家的感觉 发表于 2018-5-28 08:41
不好意思，我说的应该是drop delay，您说的是laser delay，两个还不是一回事，我理解错了，laser delay应 ...

每天用cst beads跑的check performance就包括校正laser delay。也可以用rainbow beads手动校准。鞘液压力或者激光光路的轻微改变都会影响laser delay，从而影响信号强度，最好每次开机后校准一次。

家的感觉

hezeljgouc 发表于 2018-5-28 09:08
每天用cst beads跑的check performance就包括校正laser delay。也可以用rainbow beads手动校准。鞘液压力 ...

明白了，谢谢

hezeljgouc

immunology 发表于 2018-5-27 00:30
您说的很好，我原先想的跟您一样，因为我是学生，不大方便拆开机器看里面的滤光片型号，但是我推理我们的 ...

总感觉我之前说的不同激光激发的荧光信号的隔离方式有问题，查了些资料果然不对。应该是你所说的每根激光检测点后边应该有一个pinhole，只有对应激光器激发产生的荧光信号才能通过，并被光纤引导到PMT。这样就是从硬件层面将不同激光激发产生的荧光信号隔离，每根激光对应一套PMT，所以才不会相互干扰。但是前边所说的关于laser delay还是正确的。

immunology

hezeljgouc 发表于 2018-6-1 10:43
总感觉我之前说的不同激光激发的荧光信号的隔离方式有问题，查了些资料果然不对。应该是你所说的每根激 ...

请问这些资料您是在哪查的，能不能给我说一下出处，非常感谢您。