flowjo分析凋亡，这个数据对吗？（PS：请ni大神帮看看）

jamiejamie

       各位大神老师好！（PS：如ni大神帮忙，感激不尽）
            本人流式新手，最近做肿瘤细胞系av-fitc-Pi凋亡，av用的FL1，PI用的FL2通道。机器是partec公司的cube8。单染的av用正常细胞经诱导凋亡处理，Pi正常染色。有几个问题想请教各位老师，希望各位老师不吝赐教，感恩。
            图1是双阴组细胞及圈门后情况，此门应用于全部样本；图2是av组及圈门后情况，图3是PI组及圈门后情况。
           请问：1.为什么双阴组细胞经过圈门后还有分群情况？是否我门圈的不对？
                     2.AV单染感觉分群不明显，而且组应用的门感觉不在细胞最集中点？
                     3.PI单染细胞怎么都跑到双阳区域了，不沿着Y轴分布了，而且圈门后的细胞也存在2个分群。
           恳请各位老师帮分析下。
          另外还有一个问题就是，如AV、PI单染补偿ok，怎么把这两张图及双阴组 三张图放一起，同时画十字门，并且组应用于所有样本？单张图话十字门我都会，可是不会三张同时画同一个十字门呀。
         谢谢各位老师！能不能毕业全靠这个实验了。

jamiejamie

为啥调节补偿不能全部应用啊？

niwanmao

想毕业，为什么用这么小众的仪器？因为数据兼容性，这些仪器大多建议用仪器自带软件分析，在第三方软件上，很容易出问题。

首先不知道你的肿瘤细胞大小如何？
其次，为什么FSC和SSC用Log坐标？
第三，双阴性组出现PI+，是污染还是其它原因？

jamiejamie

谢谢倪老师！您的意思是fsc、ssc分析的时候用liner坐标呗，然后fl1等荧光通道用log呗。细胞感觉没有污染。另外，我这个细胞感觉挺大的。

robert1988

jamiejamie 发表于 2018-7-7 08:07
为啥调节补偿不能全部应用啊？

需要把没有用到的通道都删掉才能调补偿

niwanmao

jamiejamie 发表于 2018-7-13 21:33
谢谢倪老师！您的意思是fsc、ssc分析的时候用liner坐标呗，然后fl1等荧光通道用log呗。细胞感觉没有污染。 ...

细胞大的话，FSC和SSC用LIN，双阴性出现PI＋的死细胞，本身就已经说明有实验出问题了

jamiejamie

robert1988 发表于 2018-7-13 23:43
需要把没有用到的通道都删掉才能调补偿

我试试，谢谢您啦！

陆定艳

楼主，你可以将你的fiowJo软件分享给我吗？我找了这个软件很久了，还是用不了，求分享....万分感谢，邮箱1347967401@qq.com

erran0

陆定艳 发表于 2018-7-26 18:34
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您好，能也分享给我一下吗，非常感谢！！763415505@qq.com