关于Lin抗体

yuemin5 · 发表于 2019-8-27 11:07:24

我有一个关于lineage的问题，一般我会直接买Lineage cocktail，但是这次找不到最合适的产品，想自己买单色的来配，但是不知道各个抗体的配比。请问倪老师和各位战友是否有经验。谢谢！

niwanmao · 发表于 2019-8-27 21:57:56

主要是你这个系列混合抗体用于排除什么或者检测什么细胞的呢？

liuruiluna · 发表于 2019-8-28 18:38:04

本帖最后由 liuruiluna 于 2019-8-28 18:39 编辑

找不到合适的是因为里面的抗体组成改了么？造血干细胞的是有的。
一般你按照你用的细胞量（1x10^5-1x10^7）每种抗体单次染色用量加每种抗体就行，比如说明书说这个抗体一 100ul加5ul，抗体二 100ul 体系加0.125ug，你就分别取这么多抗体加到一个EP管中配制cocktail就行。如果做的精致一些，也可以先滴定各种抗体用量，再用这个量配制cocktail。

yuemin5 · 发表于 2019-8-28 19:51:08

我想做DC的检测，排除其他的细胞，建议的Lineage抗体是CD3, CD20, CD66b, CD335 （https://www.biolegend.com/en-us/dendritic-cells）

niwanmao · 发表于 2019-8-28 21:48:11

yuemin5 发表于 2019-8-28 19:51
我想做DC的检测，排除其他的细胞，建议的Lineage抗体是CD3, CD20, CD66b, CD335 （https://www.biolegend.c ...

直接按照单个TEST的量加吧。我们在临床上虽然不是做DC，但是有几管也用到LIN抗体，就是这么干的。

yuemin5 · 发表于 2019-8-29 00:13:44

我是打算这样干！dump channel 没那么讲究了

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