破膜相关问题

stars · 发表于 2019-9-16 18:17:46

请问各位站友：
用的eBioscience™ Foxp3 / Transcription Factor Fixation/Permeabilization Concentrate and Diluent破膜固定剂，染得ki67，染脾脏的MDSC时，室温破膜固定40分钟，可以很好的染色，分群明显。但是染骨髓MDSC的ki67，同样的染色方法却无法染出分群的细胞，但是我室温固定破膜30分钟后，再37℃固定破膜20分钟，就可以染得起了。染是染起了，但是我很想知道为什么。问题1：为什么染同样的指标，MDSC的ki67，但是脾脏染得起，骨髓染不起？问题2：温度对固定破膜的影响是什么呢？我只是凭感觉去改变了固定破膜的温度条件，但是原理却不清楚，很迫切的想搞明白。望大家不吝赐教！！谢谢各位！！

niwanmao · 发表于 2019-9-16 20:40:00

37度孵育出来的是真阳性吗？有图对比吗

stars · 发表于 2019-9-16 22:38:59

阳性和阴性是分成了两群，也做了空白对照，空白对照组是阴性的。

niwanmao · 发表于 2019-9-17 19:19:01

stars 发表于 2019-9-16 22:38
阳性和阴性是分成了两群，也做了空白对照，空白对照组是阴性的。

看不到完整的从设门到分析的图，很难说出问题的原因，抱歉啊。

stars · 发表于 2019-9-17 20:16:23

stars · 发表于 2019-9-17 20:28:07

上图就是骨髓染色成功的图，不知倪老师觉得这样的分群是否是染色成功了？

stars · 发表于 2019-9-17 20:29:28

另外我提的两个问题其实并不涉及结果，是原理性的问题，请倪老师再看一下吧

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