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[结构和原理] 总感觉自己的Treg数据分析有问题

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发表于 2019-9-24 13:32:00 | 显示全部楼层 |阅读模式
悬赏1流星未解决
这个两个样本的CD4+CD25+CD127- Treg的数据,感觉CD25和CD127是不是因为染色做的不好?

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 楼主| 发表于 2019-9-24 13:38:46 | 显示全部楼层
我的Treg试剂盒是BD公司的,因为三种染料荧光干扰很小,所以就没有做单色补偿。
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 楼主| 发表于 2019-9-24 14:00:14 | 显示全部楼层
感觉和我预想的结果相反。请问检测CD4 CD25 CD127的时候需要用Fc blocking试剂处理T细胞吗?
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发表于 2019-9-25 14:15:27 | 显示全部楼层
cellprobe 发表于 2019-9-24 13:38
我的Treg试剂盒是BD公司的,因为三种染料荧光干扰很小,所以就没有做单色补偿。 ...

我建议你尽量不要保存碎片,把T门内的细胞尽量取到5万以上,再看差距,现在细胞太少,容易造成比例变化很大。
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 楼主| 发表于 2019-10-12 12:52:30 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-9-25 14:15
我建议你尽量不要保存碎片,把T门内的细胞尽量取到5万以上,再看差距,现在细胞太少,容易造成比例变化很 ...

在有和没有CD3+CD28刺激的情况下,PBMC只要和间充质干细胞一起培养以后,其CD4的比例就会降低,这个是个困扰。
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发表于 2019-10-12 21:42:48 | 显示全部楼层
cellprobe 发表于 2019-10-12 12:52
在有和没有CD3+CD28刺激的情况下,PBMC只要和间充质干细胞一起培养以后,其CD4的比例就会降低,这个是个 ...

比例降低不用怕,细胞多获取一些,信号不就多了吗
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 楼主| 发表于 2019-10-18 13:44:13 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-10-12 21:42
比例降低不用怕,细胞多获取一些,信号不就多了吗

最近看了一篇文献:CD4+CD25+CD127-代表的细胞和CD4+CD25+Foxp3+代表的Treg细胞可能不一样,我换CD4+CD25+Foxp3+再试一下。
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发表于 2019-10-19 09:40:33 | 显示全部楼层
cellprobe 发表于 2019-10-18 13:44
最近看了一篇文献:CD4+CD25+CD127-代表的细胞和CD4+CD25+Foxp3+代表的Treg细胞可能不一样,我换CD4+CD25 ...

是不完全等同,但大多数情况下,相似。
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