BD C6是否可以不需要绝对计数微球绝对计数

wxd

如果样品中确实参杂一些非细胞的颗粒，并且不能通过大小之类的参数和细胞信号进行区分，那就需要通过荧光染料染色，将细胞和非细胞区分开再进行分析了。一般是用核酸染料对细胞核进行染色，再根据荧光信号的不同来进行计数了。我之前经常做的主要是细菌的绝对计数，用SYBR Green I（很便宜）或者SYTO 9（贵一些）染色，然后计数的。效果还不错。

wmj123456

wxd 发表于 2023-9-25 10:21
如果样品中确实参杂一些非细胞的颗粒，并且不能通过大小之类的参数和细胞信号进行区分，那就需要通过荧光染 ...

用c6 plus进行体积法绝对计数吗，结果准确率高不高？

Yuck

wmj123456 发表于 2023-9-25 22:42
用c6 plus进行体积法绝对计数吗，结果准确率高不高？

体积法原理上会有很好的重复性，算是精密度吧，具体准确度方面应该是不涉及到非常完美的程度。强调准确度还是计数微球为主。研发体积法够用了。我们用的体积法是贝克曼那台

wxd

如果要强调准确度的话，有两个方法，一个是进行上样体积校准，这个需要流式细胞仪有这个功能才行，C6 PLUS好像没有这个功能；
我们可以用第二个方法：梯度稀释法。具体做法是：取一个细胞含量很高，没有杂质的样品，进行梯度稀释（2倍、5倍或10倍都行），然后上样检测细胞浓度。做标准曲线，看线性拟合度。正常来讲，R2应不小于0.98。每个样品多做几次，计算CV值，可以得到精密度。多做几个稀释度，可得到检测范围。