正常人血小板CD62P表达高

wmj123456

各位老师好，最近在用人血小板染色CD62P-PE和CD41-FITC的时候，发现正常组即未激活组也是高表达CD62P，同时激活组的CD62P的百分比反而不高，补偿调节没有问题，已经做了三次了，正在找解决方案，有经验的老师能帮忙提下建议吗？不胜感激。

niwanmao

用空白对照设门分析是不正确的。
建议用Fc阻断后的FMO对照。

wmj123456

niwanmao 发表于 2021-1-16 11:57
用空白对照设门分析是不正确的。
建议用Fc阻断后的FMO对照。

倪老师，您好，我在这里面用单染cd41-FITC管作为FMO来设门的，只是这张图没有放上来，我的设门是没有问题的。您说的Fc阻断，还没有用，如果是非特异性的信号，那么实验中的也有部分信号是非特异性的，还是不能说明对照组为啥很高啊。
这个是全血血小板染色，打算再试试富集血浆血小板，看看咋样。

niwanmao

wmj123456 发表于 2021-1-16 23:13
倪老师，您好，我在这里面用单染cd41-FITC管作为FMO来设门的，只是这张图没有放上来，我的设门是没有问题 ...

血小板活化里面蛮多细节的，你参考一下这篇帖子看看是否有可改进的地方：
血小板活化、染色和分析
https://www.flowcyto.cn/bbs/thread-3905-1-1.html
(出处: 流式中文网)

adaliang1234

我也碰到类似问题，最后解决了没？

niwanmao

adaliang1234 发表于 2024-3-1 16:19
我也碰到类似问题，最后解决了没？

多方面去找一下原因：
1、样本采集后到检测的时间间隔
2、抗体质量和滴度
3、设门，不建议用空白对照设门，楼主那个设门参照用了空白，是不对的。

adaliang1234

niwanmao 发表于 2024-3-3 15:24
多方面去找一下原因：
1、样本采集后到检测的时间间隔
2、抗体质量和滴度

好的，我试试

tiger

adaliang1234 发表于 2024-3-5 09:38
好的，我试试

把FCS文件传上来，CD62P图有一半的细胞没有显示