单阳管用补偿微球好还是用同一类型的细胞好

Oitr

  各位老师们好， 我在做流式的时候有一个疑问，我培养的细胞做流式师兄建议我用培养的细胞做单阳管而不是补偿微球，更能保证补偿的准确性。但是补偿的目的不就是让阴阳性峰分开吗？我知道对于表达量比较低的marker建议用相同通道表达量较高的marker来做单阳。是否所有通道都可以用补偿微球来调补偿呢（死活除外）。到底哪个方法好

niwanmao

用同一类型的细胞最好，但是如果同一类型的细胞找不到足够多的阳性标记，那么只能选择补偿微球。
补偿微球的结果，会跟最后的补偿会有些差异，但差距不会太大。

Oitr

niwanmao 发表于 2021-12-30 20:04
用同一类型的细胞最好，但是如果同一类型的细胞找不到足够多的阳性标记，那么只能选择补偿微球。
补偿微球 ...

非常感谢倪老师的回复！！！

qingfeng

niwanmao 发表于 2021-12-30 20:04
用同一类型的细胞最好，但是如果同一类型的细胞找不到足够多的阳性标记，那么只能选择补偿微球。
补偿微球 ...

请问倪老师，补偿微球为什么能和不同的抗体结合？

niwanmao

qingfeng 发表于 2022-3-3 10:04
请问倪老师，补偿微球为什么能和不同的抗体结合？

补偿微球预先涂有识别轻链的抗体，所以会结合所有荧光抗体。

qingfeng

niwanmao 发表于 2022-3-3 11:15
补偿微球预先涂有识别轻链的抗体，所以会结合所有荧光抗体。

谢谢倪老师

savid888

niwanmao 发表于 2021-12-30 20:04
用同一类型的细胞最好，但是如果同一类型的细胞找不到足够多的阳性标记，那么只能选择补偿微球。
补偿微球 ...

倪老师：
我现在遇到几个连续表达的指标，比如其中一个CD25，上单阳管就没有明显的阴性群阳性群，这种情况下用细胞的单阳管调补偿就不合适了吧，要用补偿微球了哈？

niwanmao

savid888 发表于 2022-6-28 11:41
倪老师：
我现在遇到几个连续表达的指标，比如其中一个CD25，上单阳管就没有明显的阴性群阳性群，这种情 ...

可以用补偿微球，也可以用相同荧光素的CD3，但如果是串联染料，可能就只能用补偿微球了。