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DiOC6(3)检测线粒体膜电位的图片示例

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发表于 2010-8-1 19:14:34 | 显示全部楼层 |阅读模式

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本图片来自http://www.icms.qmul.ac.uk/flowc ... tion/ros/index.html,虽然是DiOC6(3)的结果,但同样可作为罗丹明123的检测结果示例。

横坐标是Dihydroethidium(超氧化物阴离子探针),在第三通道检测。
Dihydroethidium是一种最常用的超氧化物阴离子荧光检测探针。可以直接用于活细胞的标记。Dihydroethidium被活细胞摄入后,可以在细胞内的超氧化物阴离子作用下脱氢,产生ethidium。Ethidium (例如溴化乙锭)可以和RNA或DNA结合产生红色荧光。当细胞内的超氧化物阴离子水平较高时,产生的ethidium较多,红色荧光就较强,反之则较弱。这样就可以用dihydroethidium进行超氧化物阴离子水平的检测。
纵坐标是DiOC6(3),在第一通道检测,用来判断线粒体膜电位的降低程度。

DIOUV.jpg

罗丹明123的染色步骤请参见http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-191-1-1.html

回答者:兔子赵
请教 我没有怎么看明白,因为我对这个不是很了解
1、染料是用了Annexin V  +PI +罗丹明123么?还是仅仅激发光用Annexin V   PI来表示?
2、图中是如何画的门?
不好意思 不是很了解 请赐教
2009年8月12日 0:54

回答者:niwanmao 回复兔子赵:
1、是我理解错误,这些细胞是作者利用ANNEXIN V+<strong>DAPI</strong>染色设门之后,再进行HE和DiOC(6)双坐标分析的,我在上面的正文里已经改正了。
2、图中的设门是根据正常细胞进行设的,可能是不是正常的十字门,但你也可以设成正常的十字门。
2009年8月12日 0:54
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