JC-1检测线粒体膜电位

niwanmao

周利 发表于 2014-06-21 14:36:48

                               
登录/注册后可看大图

今天又做了一下线粒体膜电位检测，有了好的结果，之前的图是没有调补偿惹的祸，谢谢大家的帮助！

上面两个图感觉即使调了补偿差别也不大吧

周利

老师，您说的太对了，我礼拜六又做了一次，调补偿后出来了很好的结果，我用的是1、2通道，确实补偿调的很多，至于可以3通道我还没试，下次做可以试试!

周利

didi_zhou 发表于 2014-6-12 11:48
也没有谁会同时调的。打开SetupMode，你可以用QuickSet调完电压以后直接点QuickComp调补偿，一管就可以做 ...

老师，我还想问问，为什么在直方图上看，处理后的细胞FL2通道的红色荧光从92.4%降低到了24.5%，而FL1通道的绿色荧光变化不大呢？从99%变化到98.2%

didi_zhou

从原理上相就知道，游离的染料（绿色）肯定是大量且“过量”的，且遍布在细胞内，即使细胞没有凋亡，一个细胞里面也会存在游离的JC-1（绿色、大量）和聚合体（橙色，在线粒体膜上、少量），所以细胞群会在右上角。你能看见的凋亡变化主要是橙色这部分强度变小（明显），绿色基本不变。这个跟这个实验的原理有关。

didi_zhou

周利 发表于 2014-6-24 09:51
老师，我还想问问，为什么在直方图上看，处理后的细胞FL2通道的红色荧光从92.4%降低到了24.5%，而FL1通道 ...

从原理上相就知道，游离的染料（绿色）肯定是大量且“过量”的，且遍布在细胞内，即使细胞没有凋亡，一个细胞里面也会存在游离的JC-1（绿色、大量）和聚合体（橙色，在线粒体膜上、少量），所以细胞群会在右上角。你能看见的凋亡变化主要是橙色这部分强度变小（明显），绿色基本不变。这个跟这个实验的原理有关。

周利

didi_zhou 发表于 2014-6-24 21:16
从原理上相就知道，游离的染料（绿色）肯定是大量且“过量”的，且遍布在细胞内，即使细胞没有凋亡，一个 ...

老师，非常感谢，您的回答点醒了我！

shanshui

周利 发表于 2014-6-26 14:44
老师，非常感谢，您的回答点醒了我！

你好，你能贴一下成功后的实验结果，让大家和之前的对比看一下吗？

周利

shanshui 发表于 2014-7-4 15:20
你好，你能贴一下成功后的实验结果，让大家和之前的对比看一下吗？

我贴一下我做的贴壁细胞的图片

周利

niwanmao 发表于 2014-6-21 19:37
上面两个图感觉即使调了补偿差别也不大吧

老师，我昨天做了一次悬浮细胞的线粒体膜电位检测，不明白正常细胞左上象限为什么会有一坨细胞，您帮我分析一下

niwanmao

周利 发表于 2014-07-18 09:43:51

                               
登录/注册后可看大图

老师，我昨天做了一次悬浮细胞的线粒体膜电位检测，不明白正常细胞左上象限为什么会有一坨细胞，您帮我分

你圈中这群细胞，反过来看看它位于FSC/SSC的哪个位置