急B一例，但是总是对kappa或者lambada结果不自信。

zhang4083

近日做了一个急性B淋巴白血病。

管里加入CD45-PC5，KAPPA-FITC, LAMBDA-PE,CD19-ECD ( 除了CD45，后三个抗体，是组合抗体购买的）

做完之后，看似lambda表达很强（标记为k-l-1），

但是在分析的时候，我因为总是担心ECD会影响PE结果，所以调了补偿，就是第二管（k-l-2）这时候，lambda就不会表达了。


因为对ECD和PE总是很接近，加之他们的补偿不好调。所以总是对这样的结果，不是自信。
内心中，总是问自己，kambda到底应不应表达呢？

所以请老师回答一下。（另外我的有个问题：是不是急性B，无论如何都应该是单克隆的。所以必然lambda和Kappa有个表达？）

niwanmao

Kaluza软件的加密狗没带在身边，只能明天白天帮你看看。

现在提一个问题，你在标记lambda、kappa之前，标本有没有用10倍体积的PBS洗涤三次以上？

另外，急性B细胞白血病的lambda、kappa大部分的缺失的，淋巴瘤是限制性表达的。

zhang4083

niwanmao 发表于 2015-4-6 20:04
Kaluza软件的加密狗没带在身边，只能明天白天帮你看看。

现在提一个问题，你在标记lambda、kappa之前，标 ...

第一：没有洗。为什么需要洗？去除正常血清中的干扰？
第二：急B表达缺失（lambda或者kappa）的意思是不表达吗？淋巴瘤等限制性表达是不是就是指kappa和lambda表达比例不正常？

niwanmao

zhang4083 发表于 2015-4-7 08:09
第一：没有洗。为什么需要洗？去除正常血清中的干扰？
第二：急B表达缺失（lambda或者kappa）的意思是不 ...

1、需要去除正常血清中轻链的干扰和影响 ，所以需要彻底洗涤，否则做不出来。
2、是的。


对于你的结果，看了下，可以如下设门，轻链缺失的，但由于你没有洗涤，所以可能为假阴性，建议10倍PBS洗涤三次后再做一次。