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[凋亡检测] 流式凋亡和线粒体膜电位问题

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发表于 2015-5-27 11:27:54 | 显示全部楼层 |阅读模式
2流星
本帖最后由 199579524 于 2015-5-27 12:32 编辑

JC.png
老师,这是我的线粒体膜电位的图,第一幅是阴性对照,第二幅是空白对照,第三幅图是cccp阳性对照,第四幅是加药组,我的问题是:
    1.这个图该怎么看呢?每个数据代表什么意思呢?每个象限有什么意义?我统计数据该用哪个值呢?
    2. 我的后面各组感觉没得差异,这可能是什么原因造成的呢?

========
AP.png
这是我的凋亡图,第一幅是空白对照组,第二幅是毒性药组,后面三幅是加保护药物组,我的问题是:
    1. 为什么我的晚期凋亡比较多,早期凋亡比较少,这可能是什么原因引起的?
    2. 为什么我的凋亡图跟别人的不一样,晚期凋亡的点点分布感觉有规律,会不会是机器的问题呢?

谢谢。


 楼主| 发表于 2015-5-27 11:37:03 | 显示全部楼层
怎么发布不起问题呢???好着急
发表于 2015-5-27 12:23:01 | 显示全部楼层
199579524 发表于 2015-5-27 11:37
怎么发布不起问题呢???好着急

你问题发出来了,就是没有写内容。
现在可以点击“编辑”按钮,编辑原帖。
发表于 2015-5-27 14:52:26 | 显示全部楼层
为什么这几张凋亡的图那么相似啊 ?尤其是晚期凋亡的
发表于 2015-5-27 20:52:38 | 显示全部楼层
你这里一共两个问题:
1、线粒体膜电位。我不明白你所谓的第二幅空白对照是指没有加药的还是什么标本?为什么也会有红光的降低?这不科学。正常的对照和分析方法应该如http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-188-1-1.html所示。

2、你这里的AV/PI双阳性应该是假的,可能是由于把死细胞圈进去造成或者非特异性荧光造成。可以说你的这几个标本几乎都没有凋亡。
发表于 2015-6-1 10:34:07 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-5-27 20:52
你这里一共两个问题:
1、线粒体膜电位。我不明白你所谓的第二幅空白对照是指没有加药的还是什么标本?为什 ...

这两个都是在我们这里做的,回答一下这位学生和倪老师的问题:1、感觉她的空白对照也是加了药的,或者细胞状态太差,细胞明显分两群,红色荧光很弱。这个属于实验操作问题,附上一张最近别人做的较好的图
1.jpg

2、右上角的是晚期凋亡和死细胞,不是假阳性,凋亡分析的时候是应该算进去的,如果排除了就更没什么凋亡了,下面是她的FSC-SSC图,红色表示晚期凋亡或死亡细胞,蓝色为正常或早期凋亡细胞
2.jpg

发表于 2015-6-1 11:31:53 | 显示全部楼层
stef1981 发表于 2015-6-1 10:34
这两个都是在我们这里做的,回答一下这位学生和倪老师的问题:1、感觉她的空白对照也是加了药的,或者细 ...

嗯,了解了,感谢反馈。

第2项检测的P1还是要排除掉好一些。
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