请教检测外周血淋巴细胞的细胞因子IFN-γ，IL-4操作步骤？

niwanmao · 发表于 2010-8-1 20:48:13

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标题：请教用流式细胞术检测外周血淋巴细胞的细胞因子IFN-γ，IL-4操作步骤？需要有哪些药物刺激诱导呢

FCM检测PBMC中CD4+CD25+,该选择怎样的抗体？荧光染色方面也想知道该选择什么荧光染色，操作步骤？

回答者：niwanmao[

流式细胞术检测外周血淋巴细胞的细胞因子IFN-γ，IL-4操作步骤请参见权威书籍的相关章节： http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=viewthread&tid=1619

可以使用PMA, Ionomycin等刺激。

CD4、CD25可以分别选择FITC、PE，因为CD4的荧光一般比较强。

2009年8月12日 0:54

huzengwu · 发表于 2012-8-3 22:36:01

网站打不开。。。怎么回事

niwanmao · 发表于 2012-8-4 07:14:08

huzengwu 发表于 2012-08-03 22:36:01

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网站打不开。。。怎么回事

哦，SoRRY，这是以前的问答平台链接，所以失效了，这两个因子刺激得好还是很好测的

niwanmao · 发表于 2012-8-6 09:04:39

huzengwu 发表于 2012-8-3 22:36

登录/注册后可看大图

网站打不开。。。怎么回事

链接已纠正。谢谢你的反馈。

yxzxlmlf · 发表于 2018-7-24 21:14:30

倪老师，我最近做大鼠外周血的IFN和IL-4，裂红后加PMA Ionomycin BFA刺激5h，然后染CD3 CD4，接着用eBioscience固定/破膜kit，染胞内因子，胞内怎么都染不上，刺激剂和固定破膜剂都试过别人的，还是染不上，找不到原因，想听听您的意见

niwanmao · 发表于 2018-7-24 21:59:30

yxzxlmlf 发表于 2018-7-24 21:14
倪老师，我最近做大鼠外周血的IFN和IL-4，裂红后加PMA Ionomycin BFA刺激5h，然后染CD3 CD4，接着用eBiosci ...

如果能排除掉固定和破膜的问题，抗体原因能否排除？
建议开个新帖，然后将结果图形传上来看看

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