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[凋亡检测] jc-1检测肺泡二型上皮细胞线粒体膜电位

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发表于 2015-12-9 11:22:54 | 显示全部楼层 |阅读模式
1流星
各位前辈,本人第一次用流式检测线粒体膜电位,购买的jc-1是碧云天的,按照说明书操作后上机检测,所用机器是beckman fc500.
对于结果有几个不明白的地方,希望各位前辈提点。
1,control 染色组与 cccp处理组变化不大,
2,加药组与cccp处理组变化也不大。
3,无论如何调节补偿,得到的点图都是斜的。

con未染色

con未染色

con未染色补偿后

con未染色补偿后

con染色

con染色

con染色补偿后

con染色补偿后

cccp处理组

cccp处理组

cccp处理组补偿后

cccp处理组补偿后

加药组

加药组

加药组补偿后

加药组补偿后
发表于 2015-12-9 15:11:21 | 显示全部楼层
大致看了下比例,确定都差不多。
不知道是不是你在消化的时候导致的细胞损伤?

另外,补偿调成这样也足够了,只要把下面那群圈出来就行了,不是说非得用十字门。
 楼主| 发表于 2015-12-9 16:46:45 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-12-9 15:11
大致看了下比例,确定都差不多。
不知道是不是你在消化的时候导致的细胞损伤?

谢谢倪老师。我也考虑消化过度的问题,原代细胞贴壁比较牢,已经尽量缩短胰酶消化时间了,不知道倪老师有没有更好的办法解决细胞消化损伤的问题。
发表于 2015-12-9 18:04:03 | 显示全部楼层
rolling 发表于 2015-12-9 16:46
谢谢倪老师。我也考虑消化过度的问题,原代细胞贴壁比较牢,已经尽量缩短胰酶消化时间了,不知道倪老师有 ...

你是先消化成悬浮细胞然后再染色?可以考虑直接把染液加进去,染色完毕去掉染色液再刮下来或消化下来
 楼主| 发表于 2015-12-9 20:49:05 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2015-12-9 18:04
你是先消化成悬浮细胞然后再染色?可以考虑直接把染液加进去,染色完毕去掉染色液再刮下来或消化下来 ...

我是先消化再染色的,下次试试版上染色再消化,还有个问题想问问倪老师,jc-1的浓度需要滴定吗。浓度会不会影响荧光强度。
发表于 2015-12-9 21:08:04 | 显示全部楼层
rolling 发表于 2015-12-9 20:49
我是先消化再染色的,下次试试版上染色再消化,还有个问题想问问倪老师,jc-1的浓度需要滴定吗。浓度会不 ...

多数情况下还好,滴定一下比较好。
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