实验材料：

1；一抗：兔多抗CD3E(浓度0.3mg/ml)

2；二抗：FITC-羊抗兔IgG(浓度2mg/ml)

3; 浓缩型山羊血清

4；细胞用PBS缓冲液

5；样本：Jurkat细胞（2x107个/ml）

实验分组：

间标实验步骤：

1；取7个1.5ml EP管，每管加200μl 样本细胞，分别标记为B1、B2、B3、B4、B5、B6、B7。

2；根据实验分组分别加入相应量的浓缩型山羊血清，37度孵育10分钟，不洗。

3；根据实验分组分别加入相应量的一抗，37度孵育30分钟。离心清洗3次，转速1500rmp/min，时间5分钟。

4；根据实验分组分别加入相应量的浓缩型山羊血清，37度孵育10分钟，不洗。

5；根据实验分组分别加入相应量的二抗，37度避光孵育30分钟。离心清洗3次，转速1500rmp/min，时间为每次5分钟。

4；上机分析结果。（FITC通道电压默认为124，手动调节为30，补偿无需调节。用BLANK组画散点图，圈门，再画叠加直方图，观察趋势）

实验结果：

以上是阴性对照的几个图，从直方图来看，封闭对抑制非特异染色作用明显

封闭效果：封闭>不封闭，封闭两次>封闭一次，一抗后封闭>一抗前封闭

以上四个图也可以看出封闭确实有效果，而且在一抗后封闭比在一抗前封闭效果要好