问

先来看两幅图。


图1


图2

上面这两幅图，你看出什么区别了没？
比较明显，图1的波峰基底明显宽于图2，也就是说，图1的CV值明显大于图2，这意味着什么？如何纠正？

答

CV值偏大，超出正常范围，往往意味着仪器失控，原因可能是：

• 喷嘴被细胞团块部分堵塞
• 光路轻微偏离，就是说激光与流动室交叉点轻微偏离了正确的位置
  

解决方法如下：

如有条件，建议用超声波清除喷嘴的堵塞，然后再跑一下校准微球，用专用工具调节喷嘴和激光位置，校准机器。

正常情况下，激光应该与液流相交，并且相交点应该特定位置，同时校准微球跑出来的图形应该是如图2那样又细又亮。
实例

在现实工作或实验中，如何及时发现喷嘴堵塞或光路偏呢？
1、定期跑一下校准微球，这个钱还是得花的。
2、注意图形变化，这里举个实例：

我们前段时间的Navios流式细胞仪跑出的图形，明显看到CD45存在很长的拖尾，后来跑了下FlowCheck Pro，发现部分通道荧光偏弱并且CV值偏大

请工程师用专用工具清除喷嘴堵塞并校准光路后，CD45/SSC散点图就恢复正常了，不再出现CD45拖尾了。

所以，很多时候，实验结果好不好或者漂亮不漂亮、可靠不可靠，除了实验方案和步骤，还跟仪器的状况关系很大。BD的仪器可以定期1～2周跑一次CST微球，Beckman定期跑一下FlowCheck，艾森或其它小仪器可以定期跑一下Rainbow微球，相当于对机器做定期体检，保证大家的实验结果。