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学习了,但是这样画门会不会有主观因素,需要有经验的人才能识别该不该画曲线门 |
倪老师,最近碰到一个问题,就是染了四色的抗体,对照管3个通道细胞分布都挺好,都在10^2一下,但就是PE通道,细胞总是压线,不知道是什么原因。如图所示。对照管每个通道所呈现出来的荧光强度由什么决定的呢?跟细胞的属性相关吗?因为不同的细胞群阴性画线不一样所以应该是跟细胞的属性相关的吧??求解惑 |
会开花的笔 发表于 2017-1-20 22:19 这不是主观,而是经验。随便乱设,才叫主观。 |
会开花的笔 发表于 2017-1-20 22:33 对照管的细胞和这管的细胞不是同类细胞? 细胞不同,尤其是FSC和SSC相差大的话,某些标记是可能会存在不同本底荧光。 |
niwanmao 发表于 2017-1-20 22:37 是两种亚型的细胞,大小是差异蛮多,如果全圈的话就没啥阳性了,分开圈阳性倒是挺高,但就存在一个问题,PE通道压线,这两群细胞分不开,这样一来上机的时候我是圈的其中一群,但就是这群细胞,PE通道就压线,并没有换到另一群 |
会开花的笔 发表于 2017-1-20 22:44 全圈没有阳性,分开阳性?什么意思,不太可能啊。发现这样讨论离题了,开个新帖,放上图片讨论吧。 |
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