Live/dead Red的补偿

mlwang · 发表于 2017-3-17 15:42:19

将Live/dead按说明书用DMSO溶解，取0.1 微升在 100微升PBS中对细胞进行染色，发现单染管阴性群和未染色管细胞的MFI值相差很大，将单染管阴性群调至合适位置时，未染色管细胞就会被压至轴上，反之，当未染色管细胞位置适合时，单染管阴阳性群则远离轴。而且，Live/dead red 与FL2、FL4的补偿达83%、138%，但从散点图上看补偿仍不够。初步考虑可能是染料的浓度过高所致。请问：Live/dead浓度多低才会合适？降低浓度会解决这些问题吗？谢谢！

niwanmao · 发表于 2017-3-17 20:21:43

我做过一批，补偿是大，但是可以用斜向门区分的。
浓度按照说明书即可。

mlwang · 发表于 2017-3-20 10:48:46

谢谢回答！我想再试试更低浓度的，有了结果再来讨论

小红子 · 发表于 2017-7-20 10:32:05

这个试剂盒上好像说尽量不要用PBS做为buffer，我一般用生理盐水

774055480 · 发表于 2017-7-20 11:02:16

我用的是BD 的FVS系列染料，肿瘤组织取出的细胞进行染色，补偿控制在80%左右，不过觉得还是大，也和死细胞的多少有些关系的，如果染PBMC之累的就很小了。

浪漫纷飞 · 发表于 2017-8-16 19:39:19

不是吧，我一直在用，补偿可以忽略啊，说明书也是这样说的，最大补偿不会超过5%。

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[细胞因子检测] Live/dead Red的补偿

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