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临床倍体检测,是否该重现江湖?

发布者: niwanmao | 发布时间: 2017-3-30 21:03| 查看数: 1519| 评论数: 0|帖子模式

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曾经,在不少流式经典书籍上,倍体检测在肿瘤诊断、预后评估上都有着相当大的意义,但随着FISH的盛行、Spectral Karyotype、Digital Karyotyping等技术的出现,它逐渐淡出了临床流式界,只能在科研领域看到其孤独的身影。

但其实,DNA倍体检测这项技术尽管灵敏度不如FISH和其它新型核型技术,但看了墨西哥Alejandro Ruiz-Arguelles博士3月份发表在《Cytometry: Part B - Clinical Cytometry》上的《Simultaneous use of Multiplex Ligation- Dependent Probe Amplification Assay and Flow Cytometric DNA Ploidy Analysis in Patients with Acute Leukemia》之后,你就会发现,DNA倍体检测,真应该重出江湖。

阅读完通篇文献之后,结合作者的总结,我个人概括如下:
- DNA倍体胜在快速、简便、廉价,既不增加临床患者负担,又可给临床提供足够的预后判断价值。
- 灵敏度虽不如FISH和其它新式核型技术,但也不是说很低,通常只要总DNA含量发生≥5%的改变,就可以检测出。
- 流式检测DNA倍体的好处,就是可以结合细胞表型,选择某个肿瘤细胞亚群进行检测,明白哪个亚群发生了倍体异常,这是其它方法无法实现的。但是,对标本处理技术要求较高。
- Alejandro等人在该文中检测53例白血病患者时,流式检测DNA异倍体检出率约42%,但如果结合了一项有意思的MLPA技术(Multiplex ligation-dependent probe amplification,一种多重PCR方法,探针结合中心粒附近,能检测出多达50个不同的基因DNA序列异常,单独应用异常检出率53%),就可以使两者缺点互补,使得异倍体检出率提高到72%。记住,两者真的是有很好的互补性,见下面两张表:
表1、流式DNA倍体和MLPA检测出核型异常结果相符的标本
Fig1.png
Fig2.png

  表2、流式DNA倍体和MLPA检测出核型异常结果〖不一致〗的标本。
  最后一列中,作者做了下解释:
  a表示MLPA检测到的核型异常太小而导致流式无法检测到。
  b表示MLPA检测到的核型相对平衡,有增有减,最终使得DNA含量几乎不变,导致流式检测不到。
  c表示流式检测的倍体太少,而使得MLPA检测不到。
  d表示异倍体是近单倍体,所以MLPA检测不到。
  n表示两者不一致的原因无法解释。
Fig3.png Fig4.png


  当然,尽管我十分支持临床倍体检测重出江湖,但细想之下,目前存在不少困难:
  1、科研用的PI染色试剂不适合活细胞染色,细胞乙醇固定后,无法再标记其它表面或胞内抗原。
  2、适合临床用的BD CycleTest Plus和Beckman DNA Prep价格偏贵,目前的倍体检测收费,浙江省收费目录上“脱氧核糖核酸(DNA)倍体分析”仅70元,成本收不回。
  3、试剂无证,监管部门不会让你开展。

换成是你,你会怎么考虑?

点击下面图标开始阅读原文PDF,支持划词翻译(PDF文件2兆多,请耐心等待加载):
https://flowcyto.cn/bbs/forum.php?mod=attachment&aid=MTIyMzl8ZGVmMDQwZDd8MTcxMzI5NTgyNnwwfA%3D%3D


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