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研究人体免疫系统,如何搭配方案?别担心

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发表于 2017-4-25 19:57:49 | 显示全部楼层 |阅读模式

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人体的免疫系统,俗称“免疫力”,主要由粒细胞、T细胞、NK细胞、单核细胞、树突状细胞和B细胞等组成,每类免疫细胞又细分为许许多多子类。如此众多的免疫细胞互相之间保持着一定的平衡状态,组成了一个完善的网络,像一支“静若处子,动如脱兔”的部队,时时刻刻保护着我们身体的健康。

下图是Nature Reviews上的一幅模式图,该图演示了不同感染情况下,人体免疫系统发生的不同反应:
Fig1.jpg

正是由于免疫细胞在对抗胞内细菌、真菌、寄生虫感染以及抗肿瘤等方面起着十分重要的作用,所以现在的科研、临床上都十分重视免疫细胞的定量检测。但是,在免疫细胞的检测方案及其荧光素搭配上,除了那些免疫学专业做得十分精的研究人员,大部分做免疫细胞与疾病相关的科研人员对搭配方案都是战战兢兢的,就怕搭错了,浪费抗体又浪费标本。

万幸的是,已经有人帮我们做了各类免疫细胞检测的设计和优化。在Beckman Coulter收购印度DuraClone之后,推出了不少干粉试剂Kit,最值得一提的就是 DuraClone IM 管 。临床研究需要研究结果达到精准、可重现且可在不同实验室和不同地域之间进行比较的要求。DuraClone IM 管基于与ONE 研究协作组的合作(www.onestudy.org),通过专业的流式实验室设计和优化了 DuraClone IM 抗体和染料组合,即用型的预混干粉试剂盒,可消除手工制备液体混合试剂)所产生的误差。管子常温避光保存即可,不需要过于担心运输时温度变化。
Fig2.png

下面将这些方案分享给大家,FLOWER们觉得需要,可以联系Beckman代理购买。

表型检测基本管
检测基本的淋巴细胞亚群和单核细胞亚群。
fig3.png
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B 细胞管
可以鉴别晚期成熟阶段的B细胞,如过渡阶段、同型抗体转换阶段、纯真和记忆阶段。
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T 细胞亚群管
显示T细胞的成熟阶段,涵盖未活化、效应、记忆和终末分化阶段。
fig7.png
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树突状细胞管
鉴别浆细胞样树突状细胞和髓系树突状细胞以及树突状细胞 3 个主要亚群。
fig9.png
fig10.png

TCR 管
评估 TCR αβ 和 γδ 蛋白链表达,以及检测 TCRγδ+ T 细 胞中的 Vδ1+ 和 Vδ2+ 亚群。
fig11.png
fig12.png

Treg 管
采用快速破膜方法分析检测 FoxP3+ 调节性 T 细胞。
fig13.png
fig14.png

最后,多色流式最令人烦恼的补偿问题,Beckman也为我们考虑到了,每一包25支装测试管均配有三套单色干粉试剂补偿盒。DuraClone IM单色补偿管均为同批号同染料的配套补偿管。

这下,整个世界清静了!
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发表于 2017-5-2 08:13:39 | 显示全部楼层
请问倪老师,Treg那一管配色方案中helios ;CD39;CD45RA这三个抗体的作用是什么?
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 楼主| 发表于 2017-5-2 09:24:49 | 显示全部楼层
只帆片影110 发表于 2017-5-2 08:13
请问倪老师,Treg那一管配色方案中helios ;CD39;CD45RA这三个抗体的作用是什么? ...

Hellios是用来区分foxP3+中的一些非Treg细胞,因为微量 活化T细胞也会表达foxP3,Hellios这个核内抗原可有效区Foxp3+ Tregs (Helios+)Foxp3+activated T cell (Helios-),并且在一些特定条件下(例如SLE时),用Hellios比CD25、CD127会更可靠。
CD39则是表达在iTregs和nTregs上。
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