腭扁桃体是位于口咽部的二次淋巴器官，对口腔病原体的防御至关重要。腭扁桃体随着年龄大小会发生变化，在3至5岁之间的儿童中最大，随后逐渐减小。作为二次淋巴器官，腭扁桃体也是B细胞发育的最后阶段的部位，其涉及过渡性B细胞的运输、抗原暴露、亲和力成熟和体细胞超突变。 B细胞是腭扁桃体的主要细胞成分，占上皮下淋巴细胞的50-90％。 B细胞及其终末分化形式——浆细胞是体液免疫的关键细胞类型。口腔扁桃体的物理位置使免疫细胞与口腔内的病原体紧密接触，并使扁桃体在口腔病原体的免疫防御中起重要作用。

除了它们在口腔病原体保护中的作用外，扁桃体也是一些口腔病原体的感染部位。一种发病率和死亡率很高的口腔病原体是爱泼斯坦巴尔病毒（EBV）。 EBV相关疾病最常见的表现是传染性单核细胞增多症，这是发达国家未接触过EBV的青少年很常见的自限性发热性疾病。 EBV也与赤道非洲最常见的儿科恶性肿瘤之一伯基特淋巴瘤密切相关。赤道非洲的儿童在生命早期经常感染EBV，较早的感染年龄与Burkitt淋巴瘤的风险增加相关。

在初次感染期间，EBV通过其受体CD21感染扁桃体中初始B细胞。虽然EBV可以体外感染所有B细胞类型，但初始B细胞更容易永生化成增殖性淋巴母细胞，是病毒感染的优先对象。

在临床上，外周血淋巴细胞和其它白细胞计数，是反映整体免疫系统功能的指标。已有充分的证据表明，外周血淋巴细胞随年龄和性别而不同，但是这些差异是否也存在于幼儿的二级淋巴组织的淋巴细胞，尚不太清楚。使用双色流式细胞仪的一项早期研究发现了扁桃体B细胞标记随年龄增长而变化，但当时无法确定具体的B细胞亚群。从那时起，越来越多的研究开始检测成年人、青少年和大龄儿童腭扁桃体中不同B细胞亚群的比例，但尚无研究检测4岁前儿童扁桃体B细胞亚群的变化。1～5岁对于理解腭扁桃体的独特免疫系统是至关重要的，而且是腭扁桃体发挥其在口腔病原体防御作用最重要的年龄范围。

美国的Wohlford等人为此进行了研究，结果发表在2017年9月9日的《Cytometry B Clin Cytom》上，回答了下述三个问题：
首先，1-5岁之间的幼儿扁桃体组织中B细胞亚群的参考范围是多少？
其次，这些孩子B细胞亚型与年龄、性别、EBV感染有何不同？
第三，在5岁内幼儿，B细胞表达CD21、EBV受体的模式是什么样的？

方案


分析的细胞群体及其标记


设门分析步骤

从左到右，从上到下逐图解析：
1、FSC/SSC散点图，选择淋巴细胞群体。
2、通过FSC-H/FSC-W排除粘连体。
3、通过SSC-H/SSC-W再次排除粘连体。
4、通过Live/Dead染料，排除掉死细胞。
5、选择CD19＋CD3－的B细胞。
6、B细胞中，根据CD38/CD24表达强度不同，主要分为：
（1）过渡B细胞——CD38hi、CD24hi；
（2）成熟B细胞——CD24＋、CD38－；
（3）生发中心B细胞——CD38＋、CD24－；
（4）浆细胞——CD38hi、CD24－、CD27hi。
7、在CD24＋、CD38－的成熟B细胞中，通过IgD与CD27将其分为4群：初始B（IgD＋、CD27－）、未转换记忆B（IgD＋、CD27＋）、经典记忆B（IgD－、CD27＋）和非典型记忆B（IgD－、CD27－）。
8、在CD38＋、CD24－的生发中心B细胞中，根据CXCR4分为2群：CXCR4＋的中心母细胞和CXCR4－的中心细胞。


接着，分选出不同B细胞群，检测其EBV载量。


结果
1、初始B是5岁内儿童扁桃体B细胞最主要的组成部分，约占扁桃体总B细胞的40％。详细亚群分布见下表：

2、初始B细胞随着年龄增长而降低，非典型记忆B和经典记忆B则逐渐增高，这与抗原暴露增多有关。
3、5岁内儿童约60％存在EB病毒感染，EBV病毒载量比之前报道的要高（3.2×10E6/10E6个扁桃体单个核细胞）。从分选后的细胞看，EB病毒主要存在于记忆B亚群中，这与EB病毒初次感染时对象为初始B细胞、之后由记忆B细胞携带的理论模型是一致的。
4、扁桃体B细胞亚群中CD21的表达水平不同，初始B表达强度最高，由于CD21是EV病毒结合的受体，所以5岁内大量的初始B，为EB病毒感染提供了良好的入侵途径。

大自然创造了人类这个神奇的生物，然而却同时也给人类创造了很多挑战。这是为什么？

参考文献：
Wohlford EM, Baresel PC, Wilmore JR, Mortelliti AJ, Coleman CB, Rochford R.Changes in tonsil B cell phenotypes and EBV receptor expression in children under5 years old. Cytometry B Clin Cytom. 2017 Sep 8. doi: 10.1002/cyto.b.21589.

精彩！！！

很棒的文章 能解释临床的问题