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基因魔剪—CRISPR/Cas9系统(三)

发布者: infouniv | 发布时间: 2017-9-18 10:50| 查看数: 791| 评论数: 0|帖子模式

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本帖最后由 infouniv 于 2017-9-18 10:51 编辑

  CRISPR/Cas9系统除了在基因敲除等基因编辑方面的应用外,通过对Cas9序列进行突变失活其催化亚区,并将失去核酸剪切活性的dCas9与一个转录激活亚区融合,表达融合蛋白,在向导RNAgRNA)的引导下,结合到靶基因的启动子区域,特异性地增强目的基因的转录活性。利用CRISPR/Cas9系统的序列识别特异性以及操作简便性,科研人员可以容易的进行特定基因的转录激活操作。在本期小优专题中,小优将为您介绍优宁维在CRISPR/Cas9系统基因转录激活应用方面的产品与服务。

  1. 激活质粒
产品说明
  CRISPR/Cas9激活质粒是根据SAM转录激活系统设计的特异性的增强目的基因表达的质粒;
  CRISPR/dCas9激活质粒包含了以下1:1:1配比的三种质:编码失活的Cas9核酸酶(D10AN863A)与反式激活结构域VP64融合蛋白的质粒;编码MS2-p65-HSF1融合蛋白的质粒;以及编码靶基因特异性的20 nt向导RNA的质粒;SAM系统提供了强健的转录因子,可以高效率的增加目的基因的转录活性;CRISPR/Cas9激活质粒支持人类与小鼠的基因的转录激活应用产品分别用名称后面的h)与(m)标记区分;提供纯化过的质粒,可直接用于转染。

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1. 激活质粒工作原理示意图

  2. 慢病毒激活系统
  产品说明
  慢病毒激活系统通过慢病毒侵染向细胞内转到编码了高效特异的过表达目的基因的SAM转录激活系统质粒;
SAM复合体位点特异性的结合到转录起始位点上游约200-250 nt的位置,提供强劲的转录因子活性,高效的增强基因转录活性;
慢病毒激活系统保存在200 μl含有25 mM HEPES pH7.3的冰冻DMEM培养基中,包含表达靶基因转录上调过程中需要的三个关键原件的质粒:编码失活的Cas9核酸酶(D10AN863A)与反式激活结构域VP64融合蛋白的质粒;编码MS2-p65-HSF1融合蛋白的质粒;以及编码靶基因特异性的20 nt向导RNA的质粒;适用于难于转染的细胞;慢病毒激活系统支持人类与小鼠基因转录激活应用,产品分别用名字后面的(h)和(m)来标记区分。
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2. 慢病毒激活系统工作原理示意图

  以上就是小优为您带来的CRISPR/Cas9系统在转录激活方面应用的产品。到这里,小优专题第二期之CRISPR/Cas9篇也要完结了,相信通过这个专题,大家对CRISPR/Cas9系统最主要的两大应用—基因剪切以及转录激活都有了较为深刻的认识,在涉及到相应的实验时,不要忘记优宁维的产品哦。优宁维为您提供全面、专业以及高质量的CRISPR/Cas9相关产品,助力科研

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