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试剂的问题还是操作过程的问题

发布者: luyexianzong | 发布时间: 2018-3-25 00:58| 查看数: 427| 评论数: 5|帖子模式

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本帖最后由 luyexianzong 于 2018-3-25 11:02 编辑

图1 和2, 3和4, 5和6  都是同一批试剂,其中1,3,5,是2个月前的检测,2,4,6是二个月后的检测。加的检测抗体的量是一样的。这是不是因为偶联的荧光抗体有降解,还是补偿不够?检测模板可能中间被人调过。请大家多提宝贵意见,越多越好。多谢多谢!

1 CD79 single positive-- CD3CD79a.png
2 CD79a single positive---CD3-CD79a .png
3 MHC II single pos. CD3 MHC-II.png
4 MHC II single positve, CD3:MCH II.png
5 CD3 pos.--CD3CD79.png
6 CD3 single pos --CD3-CD79.png

最新评论

luyexianzong 发表于 2018-3-25 01:04:40
本帖最后由 luyexianzong 于 2018-3-25 11:05 编辑

请大家多提意见。谢谢!是不是因为CD3和CD79的透膜处理也有问题?
niwanmao 发表于 2018-3-25 15:08:38
luyexianzong 发表于 2018-3-25 01:04
请大家多提意见。谢谢!是不是因为CD3和CD79的透膜处理也有问题?

应该是CD3的问题吧,CD3不破膜也能染上啊
luyexianzong 发表于 2018-3-25 22:09:09
niwanmao 发表于 2018-3-25 15:08
应该是CD3的问题吧,CD3不破膜也能染上啊

在第2次检测的时候,CD3我既做了表面染色,也做了破膜染色,就是说CD3染了2次。
但是也有文章说这个CD3抗体批次间稳定性差。
我的第一次和第二次的CD3是同一批次抗体,不过是在4度一直放在的。
多谢倪老师。
有人也怀疑CD79和MHCII的这两个抗体因为是偶联的,是不是还有些解离了?
niwanmao 发表于 2018-3-26 09:25:59
luyexianzong 发表于 2018-3-25 22:09
在第2次检测的时候,CD3我既做了表面染色,也做了破膜染色,就是说CD3染了2次。
但是也有文章说这个CD3抗 ...

CD79和MHCII如果解离了,应该是信号测不到才对,可是图上的信号分群是正常的,所以我觉得这两个抗体应该是好的。
反倒是CD3出问题了,具体是什么原因造成的,说不好,但肯定是染不上了。
luyexianzong 发表于 2018-3-26 13:04:39
niwanmao 发表于 2018-3-26 09:25
CD79和MHCII如果解离了,应该是信号测不到才对,可是图上的信号分群是正常的,所以我觉得这两个抗体应该 ...

多谢倪老师! 您这提醒的太对了。看来文章上说的这个CD3的稳定性欠佳。我的多考虑,另外我自己的操作步骤要更加细化了。
请您帮忙指点对破膜的细节上要注意的点。
多谢多谢!
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