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来,在微小残留病检测基础上加个白血病干细胞检测如何?

发布者: niwanmao | 发布时间: 2018-4-10 17:44| 查看数: 330| 评论数: 0|帖子模式

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急性髓细胞白血病(AML)是成人最常见的急性白血病。最近,通过下一代测序(NGS)发现白血病克隆存在异质性和演变。这种异质性认为是源自白血病干细胞(LSC)。据推测,LSC可能对目前的化疗方案有抗性,并导致疾病的复发,因此具有深远的临床意义。

对于LSC,目前认为有不少标记,如CD123、CLL-1、CD97或TIM-3。原始细胞区域的CD34 + CD38-部分被认为是富含LSC的,但也包括正常的HSC。那么应该如何分析呢?

参考下图正常人骨髓,A图圈中原始细胞区域后,B图可圈选hematogones作为CD38+参照,当然另外也可以用D图中的浆细胞做阳性对照,至于C图的区分,我个人觉得不妥,因为原始单核的CD36应该是阴性的,原始红细胞也是CD36阴性的(参见http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-1541-1-1.html),至于D图将原始细胞区域分为几个区域,其中的P6才是我们关注的LSC所在区域:
56976fig1large.jpg


在F图中,P6区域通过CD90和CD45RA表达进一步区分正常和恶性造血前体的几个阶段:
1、正常HSC:CD34 + CD38-CD90 + CD45RA-
2、多能祖细胞(MPP):CD34 + CD38-CD90dimCD45RA-
3、淋系前驱多潜能祖细胞(LMPP):CD34 + CD38-CD90-CD45RA +
4、白血病干细胞LSC:CD34 + CD38-CD90+CD45RA +

下面看两例患者的LSC初诊和复查结果,A、B这例患者LSC初诊少,复查时反而增多,因此其分子生物学的MRD始终在0.01%水平,下不去,而C、D这例患者则复查时LSC显著减少(在此图中,我又看到一个有问题的地方,就是LSC应该是CD90+CD45RA+,而作者却在此图中圈了CD90-的区域,并且此图似乎存在补偿过度现象):
56976fig3large.jpg

这篇文章的图形中,存在较多漏洞,不过其中的思路我们可以借鉴,我们可以试着做得更好一些,将LSC与MRD联合起来,监测AML患者可能会更好。

参考文献:
Boyer T, Gonzales F, Plesa A, et al. Flow Cytometry to Estimate Leukemia Stem Cells in Primary Acute Myeloid Leukemia and in Patient-derived-xenografts, at Diagnosis and Follow Up. J Vis Exp. 2018 Mar 26;(133). doi: 10.3791/56976.

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