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手把手教你用多色流式测人iTreg

发布者: niwanmao | 发布时间: 2018-4-20 14:44| 查看数: 484| 评论数: 0|帖子模式

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这是油×管上的Biotechne公司出的一个视频,由于前半部分基本上都在介绍基础的流式原理、补偿等概念性知识,与我们之前发过的微信、论坛上的视频帖子均存在一定重复,故进行了截取,只取后半部分多色流式实际上机操作部分,个人看了下,非常实用。虽然视频中采用的是BD LSRFortessa,但对于其它使用Diva软件的BD其它机器同样适用,而Beckman和其它厂家的机器只需要在软件中找到相似功能设置即可,管子的设置、补偿调节上都可借鉴。

视频中采用的样本是PBMC提取后,用IL-2+TGF-beta诱导2天后用于检测。抗体方案和各标记表达的部位如下图:
Fig1.png


视频一共17分钟多一点,从Diva软件中Experiment、Tube和相关散点图的创建、各荧光通道电压的设置、跑补偿管,再到使用Diva的自动补偿功能(补偿微球)、双指数的调整、分析,最后还演示了FlowJo上的分析。可以说除了样本染色操作部分没有以外,其它部分非常完整了。话不多说,仔细观看视频体验吧:




信源:
https://www.youtube.com/watch?v=bT7buOiXPN8

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