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美国CAP认证计划中临床流式项目的检查清单,你做到了吗?

发布者: niwanmao | 发布时间: 2018-9-17 12:39| 查看数: 189| 评论数: 1|帖子模式

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CAP认证是指由美国病理学会对临检实验室进行的认可活动,所引用的法律基础是美国的相关法律,所以可能不是每个国家都承认。但CAP在2015年有一份流式项目的Checklist,对我们临床项目的开展和质量控制,保证结果的准确和稳定,还是具有很好的指导和参考价值,故编译分享。

事先说明,能力验证部分、质量管理和控制的QC部分,是完整翻译,而后半部分由于时间缘故,只翻译了提纲,供核查用,希望了解这些提纲的具体内容,可点击下面的图标阅读:
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能力验证
督察说明:同行教育记录的抽查
同行教育计划:针对仅对白血病和淋巴瘤的流式免疫表型数据进行分析和解释的实验室,该实验室参与了血液淋巴肿瘤流式解读的同行教育计划。
注意:此清单项适用于不进行样本染色和流式数据获取,但接收来自外部实验室的FCS文件和/或散点图进行解读的实验室。参加同行教育计划,对血液淋巴肿瘤和相关良性疾病进行流式数据分析,为同行能力比较提供了宝贵的教育机会。虽然没有完全模仿流式免疫表型分析中涉及的临床环境,但此计划中的同行数据可以提供一个有用的基准,从而达到评估实验室性能的目的。
合规证据:有参加白血病/淋巴瘤流式解读同行比较计划的参与记录,或有与其他实验室共同分析的病例记录,或实验室自己分析并经同行评审的记录。

质量管理和质量控制
试剂
督察说明:
新抗体验证记录的抽查;新批次抗体和新检测系统试剂确认记录的抽查 提问:您的实验室遵循哪些程序来确保遵循制造商关于试剂盒/对照试剂使用的建议?您如何确认新试剂批次的可接受性?

试剂使用
遵循制造商关于在试剂盒程序中正确使用试剂和对照的建议。 合规证据:符合制造商说明的书面程序或使用替代程序的方法验证记录

抗体滴定
在用于患者诊断之前,实验室已有新抗体的初始验证记录。 注意:在测定中使用的抗体组合的背景下,使用的抗体在感兴趣的细胞亚群上进行验证。

新试剂批号确认
将新批次的抗体和检测系统试剂的性能与旧批次进行比较,然后再投入使用并同时进行维护。

注意:需要平行染色来对比试剂或仪器功能的差异。 建议在同一新鲜对照(患者或正常)上平行比较新试剂的结果,以确保新试剂批次与旧试剂批次具有临床可比性。在具有确定验收标准的标准化控制下测试新试剂也是可接受的。 在使用新批次的抗体混合物之前,建议使用侧向散射与荧光图比较每个单独的抗体,并定义从旧批次到新批次的验收标准。只有在新旧批次之间达成一致时,才能制作抗体混合物。

记录和报告
督察说明:患者报告的抽查(包括使用I类ASR时的免责声明);记录保留策略(设门散点图/直方图)

ASR报告
如果使用从外部供应商处获得或购买的I类分析物特异性试剂(ASR)进行患者检测,则患者报告包括联邦法规要求的免责声明。
注意:ASR是抗体,包括多克隆和单克隆抗体、特异性受体蛋白、配体、核酸序列和类似试剂,通过与样品中的物质的特异性结合或化学反应,用于诊断应用以进行鉴定和定量生物标本中的单个化学物质或配体。 ASR是实验室开发的测试系统的有效成分。 此清单涉及I类ASR。 I类ASR不受美国食品和药物管理局(FDA)的预清除或FDA的特殊控制。大多数ASR是I类。此类试剂除外血库用于筛查传染病的那些(类别II或III),或用于诊断某些传染病(例如HIV感染和肺结核)(III类)。 如果实验室使用I级ASR进行患者检测,联邦法规要求以下免责声明随患者报告中的检测结果一致:"This test was developed and its performance characteristics determined by (laboratory name). It has not been cleared or approved by the US Food and Drug Administration." CAP建议加上其它说明,例如"FDA does not require this test to go through premarket FDA review. This test is used for clinical purposes. It should not be regarded as investigational or for research. This laboratory is certified under the Clinical Laboratory Improvement Amendments (CLIA) as qualified to perform high complexity clinical laboratory testing."。 使用以试剂盒形式与其他材料或仪器一起销售的试剂的试验,以及与使用说明一起出售的试剂不需要免责声明。 实验室必须出示使用I类ASR测试项目的性能指标。

记录保留
设门的散点图和直方图保留至少10年。需要FCS文件包含分析和门。 注意:该检查列表要求的目的是保留血液淋巴肿瘤诊断的设门点图和直方图、CD34干细胞计数和先天性免疫缺陷评估等记录至少10年。只要这部分信息能以电子方式获得(例如.pdf、.tiff、.jpeg文件),就不需要设门散点图和直方图的纸质副本。

对照和标准品
督察说明:质控策略和步骤的抽查;质控记录的抽查
提问:你如何确定质控失控?什么时候需要采取措施?你的实验室如何建立或验证可接受的质控范围?
发现:选择QC超出范围的多次事件,并按照记录确定所采取的步骤是否遵循实验室程序进行纠正

质控-试剂/染色
通过使用阳性对照验证试剂和染色程序的性能。
注意: 阳性对照的来源(类型)及其检测频率因特定的流式应用而异。 频率应该是:1)每天做一次淋巴细胞亚群和CD34 +干细胞质控,无论是使用单平台还是双平台方法; 2)每月至少进行一次白血病/淋巴瘤免疫分型的质控。 单平台检测CD4 +淋巴细胞和CD34 +干细胞者,需要两个水平的质控品;对于双平台检测淋巴亚群(CD4+淋巴细胞),可以只用一个水平的阳性质控品。 质控品来源应该是:1)外源的阳性质控品,例如正常人淋巴细胞或商品化淋巴细胞、CD34+干细胞定量、白血病/淋巴瘤免疫分型;2)内部阳性质控,即利用样本中正常细胞做对照,仅适用于白血病/淋巴瘤免疫分型。 合规证据: 每项测试的质量控制要求和性能的书面步骤 质量控制结果的记录

QC-单平台/双平台检测
对于单平台定量测试(例如CD4+、CD34 +细胞浓度)和CD34+干细胞浓度的双平台定量,至少每天(或每次启动流式细胞仪)分析至少两个水平的阳性细胞对照以验证试剂的性能、制备方法、染色程序和仪器。 注意: 这些质控品的其中一个水平应该是(或接近)临床决策水平,例如,HIV+个体中CD4+淋巴计数低至200个细胞/uL,或者准备进行外周干细胞采集的个体外周血中5-20个CD34 +干细胞/uL。当没有商品化质控品时,实验室主任必须实施等效程序以满足两个水平的检测要求。 在未进行患者样本检测的日子不需要进行质控。 合规证据: 每项测试的质量控制要求和性能的书面步骤 质量控制结果的记录

QC-参考范围验证
为每批质控原材料,均应建立或验证统计学上有效的目标平均值和范围。 注意:对于未经测试的质控对照,实验室必须通过重复分析建立有效的可接受范围,包括先前测试过的质控原材料。 对于分析对照,实验室必须验证制造商提供的参考范围。 合规证据: 建立和验证质控范围的书面步骤 每批质控范围验证的记录

QC-纠正措施
当控制结果超出规定的可接受限度时,会记录纠正措施。
注意: 检测时出现不可接受的结果,或者患者上次检测结果与本次差异甚大时,需重新评估,以确定患者/客户结果是否确实存在显著临床差异。 重新评估可以是重新测试患者样本。 即使患者样本不再可用,也可以重新评估测试结果,以寻找可能影响患者结果的失控状况的证据。 例如,评估可以包括将本次患者检测值与历史患者平均值进行比较,和/或根据先前结果检查所选患者结果,以查看是否存在一致的偏差(所有结果当前高于或低于先前的结果)。

QC-处理
质控样品与患者样品一起,以相同的方式由相同的人员进行测试。 注意:QC样本必须由经常进行患者测试的人员进行分析 - 这并不意味着每个操作员必须每天执行QC,只要每个仪器和/或测试系统都按要求的频率执行QC,并且所有分析人员都能定期参与质量控制即可。 在可能的范围内,必须控制测试程序的所有步骤,同时认识到分析前和分析后的变量可能因患者不同而有所变化。 合规证据: 质控样品由处理患者样品的人员处理,并有相关记录

QC-确认可接受性
在报告结果之前,对控制结果进行审查以确定其可接受性。 注意:当质控品产生不可接受的结果时,不会报告患者检测结果。
合规证据: 定义的QC范围,并有确认可接受的QC结果的记录

每月QC审查
实验室主管对质控数据进行审查,至少每月一次。
注意:必须记录质量控制数据的审查,并包括以前未解决的异常值、趋势或遗漏的后续行动。每月执行次数少于一次的QC数据需要进行审查。
合规证据: 质量控制审查记录,包括对异常值、趋势或遗漏的后续行动

流式细胞仪
督察说明: 光学校准/激光输出检查的抽查 光学校准、补偿和激光检查程序的抽查 用荧光染料标准品校准的记录
提问: 您的实验室如何监测仪器的重现性? 您的实验室如何确保每种荧光染料都经过适当校准? 您的实验室如何确定适当的补偿设置?

光路校准
有至少每天(或每次启动流式细胞仪后)监测光学校准和仪器重现性的程序,并且有监测记录。

荧光素标准品
每天使用每种荧光染料标准品(例如荧光微球)进行适当的标准化,并且记录结果用于质量控制。

补偿设置
有设置正确荧光补偿的步骤。

激光电流
有书面步骤用于确定激光电流稳定且可接受。

移液装置
督察说明: 移液校准步骤 移液器检查记录抽查

移液准确性
在投入使用之前,以规定的间隔(至少每年一次)检查用于定量分配的移液器的准确性和再现性,并记录结果。

步骤和检测体系
免疫分型
督察说明: 选择代表性检测并遵循从标本采集到最终结果报告的整个过程 如果在免疫表型分析程序审查过程中发现问题,请进一步评估实验室的反应、纠正措施和解决方案。

全血淋巴亚群计数
淋巴细胞亚群分析策略和过程的抽查(包括设置标记物以区分阴性和阳性细胞群的方法和程序) 提问: 您是如何建立或验证参考范围的? 您的实验室如何确保样品完整性? 处理样本后如何储存? 您的实验室如何验证淋巴细胞门? 如何设门保证淋巴细胞亚群的纯度?

CD34干细胞计数
CD34分析策略和步骤的抽查 CD34记录的抽样
提问: 您的实验室如何记录CD34细胞活力? 您的实验室如何定义CD34 +细胞群? 您的实验室使用哪种抗CD34单克隆抗体,使用了什么荧光素?

白血病和淋巴瘤
督察说明: 白血病/淋巴瘤免疫分型策略和步骤的抽查 患者报告和图形的抽查
提问: 如果流式白血病/淋巴瘤免疫表型分析是在实验室之外做的,那么您的实验室如何确保信息足够全面、设门正确以实现准确诊断?(流式中文网注:我的理解可能是某些实验室只负责分析数据,而染色、上机等步骤在其它合作的实验室做的,例如第三方检验机构,可以在各地设置流式检测点,但分析和报告由总部统一执行) 您的实验室在什么情况下检测活细胞的百分比? 您的实验室如何区分肿瘤细胞和非肿瘤细胞? 您的实验室如何区分内源性和外源性的免疫球蛋白染色?

稀有细胞检测
需要验证计数的低限。

DNA检测和细胞周期分析
督察说明: DNA分析策略和步骤的抽查 样本评估记录的抽查 DNA分析线性和QC记录的抽查 次优/样本拒绝记录/日志的抽查
提问: 当收到不可接受或次优的标本时,您的实验室的解决方案是什么? 您的实验室如何确保排除碎片和粘连体? 您的实验室如何确保分析包含感兴趣的肿瘤细胞? 您的实验室如何确保检测DNA非整倍性?

个人
教育和培训经历的记录,至少有4年以上工作经历。

最新评论

melodysz 发表于 2018-9-17 17:48:55
分享一份2018年最新版的CAP checklist

12.FLO_08222018.pdf

555.71 KB, 阅读权限: 20, 下载次数: 9

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