这样的结果是否可以分析

mifeng · 发表于 2010-10-21 16:50:28

用组织制成单细胞悬液后作出的结果，检测了BRDU和nestin,各位大侠看看双标的结果怎样啊？结果.jpg

niwanmao · 发表于 2010-10-21 16:50:29

再问下站长：这类目标细胞把所有的荧光都染上了，而且强度都一样。
那它们所处的象限就没有什么意义了吗？ ...
mifeng 发表于 2010-10-23 17:45

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能够不断提问，才说明你在思考，我们之间并不是绝对的问与答的关系，而是交流、互相学习的关系。非常欢迎像你这样的flower。
接下来说一下你这个问题，没错，正因为非特异性染色染上去的光都一样，所以它在双坐标图上就在对角线位置上，即所谓的火箭状，因此，即使它的尾巴大部分跑到了右上象限，也是没有阳性意义的。

mifeng · 发表于 2010-10-21 16:51:30

最好能给出分析的步骤哈，谢谢谢谢
谢谢啦

stef1981 · 发表于 2010-10-21 17:17:30

回复 mifeng 的帖子

没用单标的做补偿，结果很难说

niwanmao · 发表于 2010-10-21 20:50:44

最好能给出分析的步骤哈，谢谢谢谢
谢谢啦
mifeng 发表于 2010-10-21 16:51

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如stef1981所说，最好是经过正确补偿的。
如果没有做过补偿调节，这样的结果即使能分析出来也不可靠。
如果是做过补偿调节的，那么这样的结果就代表你的细胞状态不佳，最好重复一下。

mifeng · 发表于 2010-10-23 10:56:08

楼上两位前辈，提到了补偿的问题，我这两天也努力的翻查了一些资料，荧光补偿对于双染及以上的染色非常重要。但也有提到，好像在数据分析的过程中，荧光补偿的调节对于双染并不是绝对需要的。甚至荧光补偿设置不正确时，也可以通过正确的对照来进行弥补，这些称为“缺一型荧光染色”或FMO对照是进行正确多色荧光分析的前提保证。我想问下这里所提到的 “缺一型荧光染色”或FMO对照是什么意思？另外Stef1981前辈提到的单标补偿是否可在双标的原始数据中提取出来？
站长所说的细胞状态不佳，是什么意思啊？我的单细胞悬液是大鼠经主动脉多聚甲醛灌注后，机械法+胰酶消化所得到的，是不是这个原因造成的？
其实总的意思，俺是想问下，俺的这个结果能不能进行数据分析啊？

mifeng · 发表于 2010-10-23 10:58:15

各位前辈一定要帮助啊，生死关头靠咱们流式中文网啦

niwanmao · 发表于 2010-10-23 14:32:37

楼上两位前辈，提到了补偿的问题，我这两天也努力的翻查了一些资料，荧光补偿对于双染及以上的染色非常重要 ...
mifeng 发表于 2010-10-23 10:56

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1、FMO对照我在以前提到过：http://www.flowcyto.cn/bbs/forum ... 4&highlight=FMO
2、如果你补偿没做好，事后分析是可以在一些商业化软件中进行调节的，但是关键是你的标本经过机械法+胰酶消化之后，我看这结果已经基本上碎片或非特异性荧光了，没法分析了，所以建议还是放弃吧。

mifeng · 发表于 2010-10-23 17:10:01

站长所说的碎片是不是指的第二三张图的左下象限？
非特异荧光指的哪个象限呢？

mifeng · 发表于 2010-10-23 17:15:46

站长的意思是不是各个象限都应该有相对独立的细胞群，那样才是最好最有意义的啊？

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