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未来,流式仪器会变成什么样?

发布者: niwanmao | 发布时间: 2018-12-13 11:49| 查看数: 559| 评论数: 3|帖子模式

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今年,从Mack Fulwyler发明的细胞分选仪算起,流式技术问世53周年了。流式在血液肿瘤诊断上、免疫细胞检测上,风风火火。但是,任何事物都需要不断发展的,流式未来会变成怎么样?

1、Image Cytometry
图像流式能同时获取荧光信号、细胞形态、胞内和核内结构,能解决一些假阳性的困扰,尤其是观察一些蛋白的核、浆转位,还是很有优势。
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(图片摘自《Multiparameter Flow Cytometry in the Diagnosis of Hematologic Malignancies》)
虽然在10月底,Image Cytometry的典型代表Amnis被默克卖给了Luminex(http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-7044-1-1.html),这说明图像流式在应用上遇到了推广难的困境。我个人的感觉应该是图像的分辨率有限、通量低等原因引起。但还是希望这项技术能够继续完善和进步。

2、Spectral Flow Cytometry
光谱流式,就是利用特殊的接收装置收集420~800nm范围内的全光谱,然后利用预先学习到的各种荧光素光谱特征,从中把对应荧光素信号给解析出来。这个方法,可以免去补偿的烦恼,并且对于一些与荧光素光谱特征不一样的自发荧光,也能够自动去除,所以有较强吸引能力。
但在仪器专利和制造上还是有一定的门槛,所以目前的代表厂家暂时只看到SONY和Cytek两家。
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(图片摘自《Multiparameter Flow Cytometry in the Diagnosis of Hematologic Malignancies》)

3、Mass Cytometry
质谱流式,最近有人在微信中推了一篇文章,形容为富二代,主要是指其仪器骄贵,成本高。不过由于质谱流式采用了重金属同位素标记抗体,于是解决了常规流式的荧光干扰问题,并且由于同位素种类多,理论上可同时做100来种颜色(实际上可做到40多种),不过获取速度不够快,最高只能获取1000个/秒,通常只能获取300~500个/秒。因此,前述的光谱流式可能会对其产生了较大的冲击。
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(图片摘自《Multiparameter Flow Cytometry in the Diagnosis of Hematologic Malignancies》)


4、小型专用仪器
自动化是流式细胞仪的挑战之一,对某个专项进行自动化,相对来说还是比较简单的。所以目前流式细胞仪自动化做的最好的一块就是针对新兴国家HIV感染患者的监测,代表仪器有:BD Biosciences FACSCount、PartecCyFlow、ApogeeeAuto40和Guava EasyCD4等。 AlerePima有一种非流动技术也在二十世纪末推出,其优势在于直接收集专用滤芯上的毛细血管血液。
BD的FACSPresto®也算是一种近自动化仪器,将血样直接加在一个cartridges上机就OK了。
Beckman Coulter也有一款Aquios仪器,已经用于T细胞亚群和HIV患者自动化监测,只需要操作员将加盖的血液样本管放在适当的槽中即可,可做两种4色方案(CD3、CD4、CD8、CD45;CD19、CD3、CD16+56、CD45)。

5、微液流
近15年来,微液流技术一直在创新,不过“芯片实验室”的概念在二十一世纪才真正出现。微液流采用聚二甲基硅氧烷加工成有固定凹槽、入口和出口的装置,整体透明,对于分选和分析无荧光素或荧光素结合的细胞非常方便,在循环肿瘤细胞(CTC)分选和富集上应用比较广泛。代表厂家是日本的On-chips。
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(图片转自https://www.on-chip.co.jp/)


6、分选后单细胞基因测序
这个严格意义上不算新仪器,但算是仪器应用场景上的一个变化。流式分选后衔接单细胞基因测序,可谓是把流式分选和基因测序的优点完美的结合在了一起,同时又克服了两者各自的缺点,因此是精准诊断和治疗重要的一项技术,多家大公司均已在积极跑马圈地:)

据我所了解到的大概就这些,各位FLOWER中肯定会有更多技术派人士,如果您知道更多新的仪器和技术,欢迎留言。

参考文献:Béné, M., & Lacombe, F. (2018). Future Applications of Flow Cytometry and Related Techniques. In A. Porwit & M. Béné (Eds.), Multiparameter Flow Cytometry in the Diagnosis of Hematologic Malignancies (pp. 215-230). Cambridge: Cambridge University Press. doi:10.1017/9781316218549.015

最新评论

默背你的心碎 发表于 2018-12-13 17:37:46
厉害厉害,之前就看到过有推送 Mass Cytometry,各种优点,不用调补偿,更准确等;不过看到那些标记的元素想想就觉得不便宜。。。
niwanmao 发表于 2018-12-14 08:18:43
默背你的心碎 发表于 2018-12-13 17:37
厉害厉害,之前就看到过有推送 Mass Cytometry,各种优点,不用调补偿,更准确等;不过看到那些标记的元素 ...

最主要是机器贵,听说几百上千万,并且一旦坏了,只能等国外的工程师过来修,一修就得停大半个月
默背你的心碎 发表于 2018-12-14 17:53:47
niwanmao 发表于 2018-12-14 08:18
最主要是机器贵,听说几百上千万,并且一旦坏了,只能等国外的工程师过来修,一修就得停大半个月 ...

。。。这个着实有点麻烦,上千万有点吓人了
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