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OMIP-044:人树突状细胞(DC)28色免疫表型分析

发布者: niwanmao | 发布时间: 2019-1-13 16:47| 查看数: 910| 评论数: 3|帖子模式

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虽然大多数研究焦点都集中在T和B淋巴细胞等适应性免疫细胞,因为这些淋巴细胞是免疫系统的基本效应细胞,但抗原递呈细胞(APC)才是上游的“守门员”,它们几乎可以启动和塑造任何适应性免疫反应。因此,在过去的十年中,小鼠和人类树突状细胞(DC)亚群的区分开始越来越细化,发现了不少人DC与小鼠系统的相似性和功能差异,这些进步在很大程度上得益于流式细胞术和单细胞RNA测序(sc-RNAseq)领域的技术发展。重要的是,越来越多的证据表明,在自身免疫性疾病以及癌症进展中研究DC生物学,有可能揭示治疗干预的新方法。由于DC还存在于非淋巴组织中,并可表达共刺激或共抑制受体,故DC被认为是形成致耐受性或促炎性局部免疫环境的关键。

这里,结合sc-RNAseq的进展,介绍一个28色方案,将DC分群和功能的分析做到尽可能的极致。
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最新评论

cpu北极熊 发表于 2019-1-17 21:50:33
老师你好,对于文章最后FMO设门区分阴阳性细胞我有些疑惑,最后一列中CD86似乎有较为明确的分群;是认为那群荧光强度较弱的细胞是因为加入CD86抗体后导致的背景荧光变化,还是认为是弱表达的一群细胞呢,圈门是否是严格按照FMO圈,还是认为CD86的门圈在稍右呢?
实际关于FMO的操作也遇到类似问题,希望能得到解惑,非常感谢!
niwanmao 发表于 2019-1-18 08:15:07
cpu北极熊 发表于 2019-1-17 21:50
老师你好,对于文章最后FMO设门区分阴阳性细胞我有些疑惑,最后一列中CD86似乎有较为明确的分群;是认为那 ...

首先要确认非特异性染色水平如何,确认非特异性染色水平低的话,如上面文章中的那些图,我还是建议按照FMO严格设门,因为这里所谓的分群明显并不是在纵坐标同一水平上的分群明显。

如果是纵坐标同一水平的分群明显,是可以直接设分界处的,但是FMO理论上不会相差太大才对,否则就说明全染组存在背景荧光过强或其它干扰因素。
cpu北极熊 发表于 2019-1-18 18:58:00
niwanmao 发表于 2019-1-18 08:15
首先要确认非特异性染色水平如何,确认非特异性染色水平低的话,如上面文章中的那些图,我还是建议按照FM ...

好的,谢谢老师的指导。
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