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[细胞周期] 细胞周期

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发表于 2019-1-21 09:35:38 | 显示全部楼层 |阅读模式

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老师们,我现在在做细胞周期,为什么明明收集了200万以上的细胞,上机只收了几千个就停了。然后我的图只有一个峰-。-,每一管都是这样。我的干预组的细胞是转染了带绿色荧光的慢病毒的,具体方法就是收集细胞,百分之70乙醇固定过夜,然后pbs洗两遍,直接加入500微混好了RNASE和PI的PBS,4度放置30分钟上机。但是我发现乙醇固定过夜后,我从冰箱里面取出来的时候,管里有好多白色的沉淀一样的东西,用PBS洗过之后就消失了,不知道是为什么。然后流式那个图出来不知道为什么一个门里有两种颜色。希望老师帮助我解决一下,谢谢。

图一

图一

图二

图二

图1

图1

图2

图2
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发表于 2019-1-21 14:40:21 | 显示全部楼层
1、请注意发帖版块,请在http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?gid=37处选择相应的子版提问。
2、获取的细胞量与设置有关,CXP软件里面有个设置是在图上设置单图获取的细胞量,应该是那里设小了。
3、固定过夜出现白色沉淀,洗涤消失,应该是没固定好。所以导致你最后的结果是有问题的。
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 楼主| 发表于 2019-1-21 15:51:27 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2019-1-21 14:40
1、请注意发帖版块,请在http://www.flowcyto.cn/bbs/forum.php?gid=37处选择相应的子版提问。
2、获取的细 ...

谢谢老师的解答
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