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把细胞周期分成十多个时相,你想不想做?

发布者: niwanmao | 发布时间: 2019-4-10 10:42| 查看数: 474| 评论数: 0|帖子模式

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在人类发育和生长期间,细胞必须以有序和受控的方式增殖以形成成体。细胞周期是导致从一个亲本细胞形成两个细胞的一系列事件。重要的是,每个子细胞必须与亲本细胞相同,因此成功完成细胞周期需要精确复制和分布DNA中所含的遗传信息。细胞周期事件由大量蛋白质协调编排,这些蛋白质相互作用并共同作用,以确保细胞周期得到精确控制。分子生物学家已经发现了许多这些细胞周期蛋白。值得注意的是,这些蛋白质以及其相互作用从酵母到人类是一直不变的。

平时,我们最常用的是用PI或7-AAD标记核酸,分出G0/G1、S、G2/M三个时相,因为G0和G1、G2和M的DNA含量是相同的。最后形成的是如下的周期图:
2019041001.png

如果加上anti-Ki67、anti-phospho(Ser10)-histone H3,就可以将G0和G1、G2和M都区分开来,那就是五个时相了,这样的周期对于绝大多数科研都够用了(图片来自《Flow cytometric quantification of all phases of the cell cycle and apoptosis in a two-color fluorescence plot》):
2019041002.gif

然而,对于Geek,细胞周期的检测却无极限,简直可以用丧心病狂来形容了。

这不,Jake Jacobberger教授在《Multiparameter Cell Cycle Analysis》中,利用DAPI、phospho-S10-histone H3-A488、cyclin A2-PE、cyclin B1-A647,一共4个标记,可将细胞周期分为十多个时相的细胞周期图,将细胞周期的演变归纳为G1nb→G1a→G1b→S1→S2→G2→P1→P2→PM→M→LM1→LM2a-c→LM2d,来,先看几个震撼的图。
下图是用cyclin A2、cyclin B1、PHH3组成的三维周期图,这十几个时相显示在图上,很完美的循环:
2019041003.png

再看一个MOLT-4的三维周期图,这张图标明了三个坐标,比上面这张图更好懂一点:
2019041004.png

具体是如何进行获取和分析的呢?详见Jacobberger 2018年这篇原作,篇幅较长,在此不做翻译:Multiparameter Cell Cycle Analysis. Methods Mol Biol. 2018;1678:203-247. doi: 10.1007/978-1-4939-7346-0_11.
有这样的图,估计可以发高分吧

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