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T细胞CD3/4/8的流式问题

发布者: xiaofeia | 发布时间: 2019-6-11 17:48| 查看数: 115| 评论数: 5|帖子模式

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左边是D0的流式图,右边是D8的,D0的时候在CD3分开了(理论上CD3应该是很容易分开的),可是D8的时候CD3是没有分开的,在P3的门往左拖动的时候会发现CD4/CD8双阴细胞会增加,所以感觉是CD3阳性和阴性没有分开,而且D0(左图)的时候最后一个图的双阴比例太高了感觉,所以是什么原因导致?是三种抗体的浓度都不够吗,抗体比例是1比100,细胞量大概在5*10的5。求大神回答 T T .

最新评论

niwanmao 发表于 2019-6-12 10:31:50
D8的时候,似乎FSC和所有的抗体荧光强度都变化很明显。你这个实验用的刺激因子是什么?
tiger 发表于 2019-6-12 14:55:06
本帖最后由 tiger 于 2019-6-12 14:56 编辑

D8时CD3不是没有分开,而是所有细胞都表达CD3,你可以把DRAQ7图的门再重新圈一下,只圈阴性部分,可能更明显。
xiaofeia 发表于 7 天前
niwanmao 发表于 2019-6-12 10:31
D8的时候,似乎FSC和所有的抗体荧光强度都变化很明显。你这个实验用的刺激因子是什么? ...

50ng/mL的CD3单抗
xiaofeia 发表于 7 天前
tiger 发表于 2019-6-12 14:55
D8时CD3不是没有分开,而是所有细胞都表达CD3,你可以把DRAQ7图的门再重新圈一下,只圈阴性部分,可能更明 ...

只所以觉得并不是全部都是CD3,是因为把门往左边拉的时候会发现CD4/CD8双阴比例会增加,理论上双阴的也没那么高
xiaofeia 发表于 7 天前
tiger 发表于 2019-6-12 14:55
D8时CD3不是没有分开,而是所有细胞都表达CD3,你可以把DRAQ7图的门再重新圈一下,只圈阴性部分,可能更明 ...

DRAQ7的圈之前也试过了,基本没变,在DRAQ7中圈多的在FSC和SSC的时候分出来了
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