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OMIP-058:30参数流式分析iNKT、MAIT、NK以及常规T功能

发布者: niwanmao | 发布时间: 2019-7-31 15:23| 查看数: 226| 评论数: 0|帖子模式

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iNKT、MAIT、NK以及常规T的功能分析

适应性免疫系统的独特之处在于它能够应对病原体的结构多样性,这是通过高度多样化的T细胞受体(TCR)和B细胞受体(BCR)的表达来实现的,这些特异性克隆T细胞和B细胞平时比例很低,再次遇到对应抗原时便会大量增殖,以提供足够数量的表位特异性T或B细胞。这种扩增可能需要数天时间,并且需要其他免疫细胞辅助。

MAIT细胞、iNKT细胞和γδT细胞等非常规T细胞则显示出先天性和适应性免疫的特征。与常规αβT细胞一样,非常规T细胞表达抗原特异性TCR,只是TCR种类少、克隆数量较多,此外,来自非常规T细胞的独特TCR谱系使得它们能够识别具有独特生物化学特征的抗原,例如由非经典主要组织相容性复合物(MHC)分子呈现的微生物脂质、磷脂抗原和代谢物。非常规T细胞的功能特征包括细胞毒性和多种细胞因子的快速生成,如TNFα、IL-2、IL-4、IL-13、IL-17、IL-21、干扰素γ(IFNγ)和GM-CSF,这种广泛的效应功能与快速响应刺激的能力相结合,使非常规T细胞能够在免疫反应早期影响T细胞和B细胞反应。

NK细胞属于先天免疫细胞,表达高水平的细胞毒性分子,如颗粒酶B和穿孔素,使NK细胞在消除病毒感染或肿瘤细胞方面非常有效。此外,NK细胞主要表达三类受体,即杀伤性免疫球蛋白样受体(KIR)、天然细胞毒性受体和NKG2受体。 KIR家族由抑制和活化受体组成,这些受体与MHC I分子相互作用,并在NK细胞耐受中发挥关键作用。其他活化受体如CD314(NKG2D)识别与细胞应激相关的配体,包括MICA、MICB和ULBP或感染相关分子。此外,CD16的高表达使成熟NK细胞能够诱导抗体依赖性细胞毒性(ADCC)。在稳定状态下,NK细胞主要接受来自抑制性受体的致耐受性信号,从而阻止活化和细胞毒性。为了逃避适应性免疫识别,病原体和肿瘤细胞调节MHC分子的表达,同时上调细胞应激相关分子。

OMIP-058提供了一个30参数方案,能够用在28色流式细胞仪上,对NK细胞和常规、非常规T细胞进行深入表征,例如iNKT细胞(CD1d:PBS57四聚体+)、γδT细胞亚群(Vδ1+Vγ9-,Vδ1+Vγ9+,Vδ2lowVγ9+和Vδ2highVγ9+)、MAIT细胞(Vα7.2+ CD161high) 、常规CD4+和CD8+ T细胞。

方案
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设门步骤和解读
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