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楼主: luqhcolalove

[淋巴细胞亚群] 求粘稠的肺泡灌洗液处理方法

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发表于 2011-11-10 13:01:26 | 显示全部楼层

纱布会吸附一部分粘液

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参与人数 1流星 +1 收起 理由
niwanmao + 1 谢谢提供这个新方法,有机会试试。.

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流式中文网FlowGuard®流式专用保存液,无需冻存,稳定保护各类流式样本,从容完成实验
发表于 2016-12-27 20:16:21 | 显示全部楼层
最近在做BALF,试过各种过滤,纱布的话用的双层,而且过滤之前最好把滤过液体的那部分用生理盐水或PBS浸湿,否则你的液体都被纱布吸收了,很影响细胞数。纱布过滤是第一步,很多大颗粒还是会漏下去。离心后重悬再用细网筛过滤才好。
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发表于 2016-12-27 20:21:16 | 显示全部楼层
halolihui 发表于 2016-12-27 20:16
最近在做BALF,试过各种过滤,纱布的话用的双层,而且过滤之前最好把滤过液体的那部分用生理盐水或PBS浸湿, ...

是否可以直接200目筛网过滤?
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发表于 2016-12-27 20:23:44 | 显示全部楼层
但是,最近做的结果不是很好,收到的细胞用206和169标记,得到的巨噬细胞比例很低,多数在5-10%,达不到临床描述的百分之几十,不知道是什么原因,有时粒细胞和淋巴倒是看到很多,在思索是不是在第一步散射光FS/SS设门的时候,就把大的细胞排除在外了,是否平时做PB和BM的散射光条件不适用@niwanmao
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发表于 2016-12-27 20:34:14 | 显示全部楼层
niwanmao 发表于 2016-12-27 20:21
是否可以直接200目筛网过滤?

可以啊,我是直接在流式管上放一张滤网的,不过,因为网太细了,滤的比较慢,每次都收到10ml左右BALF。而且因为有粘液,所以第一次滤总是不顺畅。
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发表于 2016-12-27 21:34:14 | 显示全部楼层
halolihui 发表于 2016-12-27 20:23
但是,最近做的结果不是很好,收到的细胞用206和169标记,得到的巨噬细胞比例很低,多数在5-10%,达不到临 ...

临床描述的百分之几十是指形态学比例还是理论上应该达到的比例?是否可以把图放上来看看?
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发表于 2016-12-27 21:34:59 | 显示全部楼层
halolihui 发表于 2016-12-27 20:34
可以啊,我是直接在流式管上放一张滤网的,不过,因为网太细了,滤的比较慢,每次都收到10ml左右BALF。而 ...

如果用含BSA的PBS稀释后过滤会不会好一些?
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